生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2007年
1期
19-21
,共3页
卓越%樊峥%叶棋浓%严景华
卓越%樊崢%葉棋濃%嚴景華
탁월%번쟁%협기농%엄경화
人泛素结合酶9%表达%纯化
人汎素結閤酶9%錶達%純化
인범소결합매9%표체%순화
目的:表达和纯化高纯度的人泛素结合酶9(hUBC9).方法:将hUBC9基因克隆到原核表达载体pGEX-6p-1上并转化大肠杆菌BL21(DE3),于30℃、l mmol/L IPTG诱导4 h,表达GST-hUBC9融合蛋白.用Glutathione-Sepharose 4B柱分离GST-hUBC9融合蛋白,用鼻病毒3C蛋白水解酶切去GST-hUBC9融合蛋白的GST标签,再用FPLC分子筛层析法进一步纯化hUBC9.结果和结论:获得了重组表达质粒GST-hUBC9并在大肠杆菌中可溶性表达,经亲和层析、酶切、分子筛层析后获得了可溶的、高纯度的hUBC9,为进一步研究hUBC9的功能和结构奠定了基础.
目的:錶達和純化高純度的人汎素結閤酶9(hUBC9).方法:將hUBC9基因剋隆到原覈錶達載體pGEX-6p-1上併轉化大腸桿菌BL21(DE3),于30℃、l mmol/L IPTG誘導4 h,錶達GST-hUBC9融閤蛋白.用Glutathione-Sepharose 4B柱分離GST-hUBC9融閤蛋白,用鼻病毒3C蛋白水解酶切去GST-hUBC9融閤蛋白的GST標籤,再用FPLC分子篩層析法進一步純化hUBC9.結果和結論:穫得瞭重組錶達質粒GST-hUBC9併在大腸桿菌中可溶性錶達,經親和層析、酶切、分子篩層析後穫得瞭可溶的、高純度的hUBC9,為進一步研究hUBC9的功能和結構奠定瞭基礎.
목적:표체화순화고순도적인범소결합매9(hUBC9).방법:장hUBC9기인극륭도원핵표체재체pGEX-6p-1상병전화대장간균BL21(DE3),우30℃、l mmol/L IPTG유도4 h,표체GST-hUBC9융합단백.용Glutathione-Sepharose 4B주분리GST-hUBC9융합단백,용비병독3C단백수해매절거GST-hUBC9융합단백적GST표첨,재용FPLC분자사층석법진일보순화hUBC9.결과화결론:획득료중조표체질립GST-hUBC9병재대장간균중가용성표체,경친화층석、매절、분자사층석후획득료가용적、고순도적hUBC9,위진일보연구hUBC9적공능화결구전정료기출.
