临床耳鼻咽喉头颈外科杂志
臨床耳鼻嚥喉頭頸外科雜誌
림상이비인후두경외과잡지
JOURNAL OF CLINICAL OTORHINOLARYNGOLOGY HEAD AND NECK SURGERY
2007年
12期
555-558
,共4页
唐瑶云%谢常宁%刘建平%赵素萍%田勇泉%肖健云
唐瑤雲%謝常寧%劉建平%趙素萍%田勇泉%肖健雲
당요운%사상저%류건평%조소평%전용천%초건운
喉肿瘤%基因,转基因,自杀%CDglyTK%基因治疗
喉腫瘤%基因,轉基因,自殺%CDglyTK%基因治療
후종류%기인,전기인,자살%CDglyTK%기인치료
目的:研究融合自杀基因CDglyTK联合前体药物对喉癌Hep-2细胞的杀伤效应.方法:构建质粒表达载体pcDNA3.1(-)CMV.CDglyTK,XhoⅠ/HindⅢ酶切鉴定,测序分析CDglyTK基因序列.电穿孔法将重组质粒转染Hep-2细胞,400 mg/L G418筛选14 d获得稳定表达CDglyTK基因的Hep-2细胞,RT-PCR及Western-blotting鉴定CDglyTK基因的表达.以转染空白载体pcDNA3.1(-)的Hep-2细胞为对照,MTT法观察5-FC、GCV、5-FC加 GCV对表达CDglyTK基因的Hep-2细胞生长的抑制作用.结果:酶切和基因测序分析证明重组质粒含完整的CD及TK基因,RT-PCR从转染细胞总RNA中扩出707 bp的预期片段,Western-blotting检测到该基因表达的分子量为59 000的蛋白.表达CDglyTK基因的Hep-2细胞在5-FC、GCV、5-FC加 GCV干预下生长受到抑制,5-FC与GCV联合有更强的杀伤效应.结论:CDglyTK融合自杀基因可以成为基因治疗喉癌的有效方法.
目的:研究融閤自殺基因CDglyTK聯閤前體藥物對喉癌Hep-2細胞的殺傷效應.方法:構建質粒錶達載體pcDNA3.1(-)CMV.CDglyTK,XhoⅠ/HindⅢ酶切鑒定,測序分析CDglyTK基因序列.電穿孔法將重組質粒轉染Hep-2細胞,400 mg/L G418篩選14 d穫得穩定錶達CDglyTK基因的Hep-2細胞,RT-PCR及Western-blotting鑒定CDglyTK基因的錶達.以轉染空白載體pcDNA3.1(-)的Hep-2細胞為對照,MTT法觀察5-FC、GCV、5-FC加 GCV對錶達CDglyTK基因的Hep-2細胞生長的抑製作用.結果:酶切和基因測序分析證明重組質粒含完整的CD及TK基因,RT-PCR從轉染細胞總RNA中擴齣707 bp的預期片段,Western-blotting檢測到該基因錶達的分子量為59 000的蛋白.錶達CDglyTK基因的Hep-2細胞在5-FC、GCV、5-FC加 GCV榦預下生長受到抑製,5-FC與GCV聯閤有更彊的殺傷效應.結論:CDglyTK融閤自殺基因可以成為基因治療喉癌的有效方法.
목적:연구융합자살기인CDglyTK연합전체약물대후암Hep-2세포적살상효응.방법:구건질립표체재체pcDNA3.1(-)CMV.CDglyTK,XhoⅠ/HindⅢ매절감정,측서분석CDglyTK기인서렬.전천공법장중조질립전염Hep-2세포,400 mg/L G418사선14 d획득은정표체CDglyTK기인적Hep-2세포,RT-PCR급Western-blotting감정CDglyTK기인적표체.이전염공백재체pcDNA3.1(-)적Hep-2세포위대조,MTT법관찰5-FC、GCV、5-FC가 GCV대표체CDglyTK기인적Hep-2세포생장적억제작용.결과:매절화기인측서분석증명중조질립함완정적CD급TK기인,RT-PCR종전염세포총RNA중확출707 bp적예기편단,Western-blotting검측도해기인표체적분자량위59 000적단백.표체CDglyTK기인적Hep-2세포재5-FC、GCV、5-FC가 GCV간예하생장수도억제,5-FC여GCV연합유경강적살상효응.결론:CDglyTK융합자살기인가이성위기인치료후암적유효방법.