吉林大学学报（医学版）
吉林大學學報（醫學版）
길림대학학보（의학판）
JOURNAL OF JILIN UNIVERSITY(MEDICINE EDITION)
2008年
3期
364-368
,共5页
李艳博%梁硕%董丽华%杨巍%郭彩霞%孙丽光%龚守良
李豔博%樑碩%董麗華%楊巍%郭綵霞%孫麗光%龔守良
리염박%량석%동려화%양외%곽채하%손려광%공수량
TRAIL%克隆,分子%腺病毒%辐射%Egr-1
TRAIL%剋隆,分子%腺病毒%輻射%Egr-1
TRAIL%극륭,분자%선병독%복사%Egr-1
目的:构建辐射敏感Egr-1启动子诱导人肿瘤坏死因子(TNF)相关凋亡诱导配体(TRAIL)基因表达的腺病毒穿梭质粒pshuttle-Egr1-hTRAIL.方法:利用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法从pACCMV-hTRAIL质粒中扩增得到TRAIL基因片段,并将其连接到pMD19T载体进行测序,利用基因重组技术构建含有辐射诱导启动子Egr-1的腺病毒穿梭质粒pshuttle-Egr1-hTRAIL.结果:PCR扩增出约820bp的片段,测序结果证实扩增片段的序列与GenBank公布(NM-003810)的一致.pshuttle-Egr1-hTRAIL用EcoR I、 Kpn I双酶切重组得到大小为3540和4299bp的2个片段,用Sma I酶切得到1517、2282和4040bp的3个片段,用BamH I酶切得到3304和4535bp的2个片段,与预期结果完全一致.结论:成功克隆了hTRAIL基因,并构建了辐射诱导表达的腺病毒穿梭质粒pshuttle-Egr1-hTRAIL.
目的:構建輻射敏感Egr-1啟動子誘導人腫瘤壞死因子(TNF)相關凋亡誘導配體(TRAIL)基因錶達的腺病毒穿梭質粒pshuttle-Egr1-hTRAIL.方法:利用逆轉錄-聚閤酶鏈式反應(RT-PCR)方法從pACCMV-hTRAIL質粒中擴增得到TRAIL基因片段,併將其連接到pMD19T載體進行測序,利用基因重組技術構建含有輻射誘導啟動子Egr-1的腺病毒穿梭質粒pshuttle-Egr1-hTRAIL.結果:PCR擴增齣約820bp的片段,測序結果證實擴增片段的序列與GenBank公佈(NM-003810)的一緻.pshuttle-Egr1-hTRAIL用EcoR I、 Kpn I雙酶切重組得到大小為3540和4299bp的2箇片段,用Sma I酶切得到1517、2282和4040bp的3箇片段,用BamH I酶切得到3304和4535bp的2箇片段,與預期結果完全一緻.結論:成功剋隆瞭hTRAIL基因,併構建瞭輻射誘導錶達的腺病毒穿梭質粒pshuttle-Egr1-hTRAIL.
목적:구건복사민감Egr-1계동자유도인종류배사인자(TNF)상관조망유도배체(TRAIL)기인표체적선병독천사질립pshuttle-Egr1-hTRAIL.방법:이용역전록-취합매련식반응(RT-PCR)방법종pACCMV-hTRAIL질립중확증득도TRAIL기인편단,병장기련접도pMD19T재체진행측서,이용기인중조기술구건함유복사유도계동자Egr-1적선병독천사질립pshuttle-Egr1-hTRAIL.결과:PCR확증출약820bp적편단,측서결과증실확증편단적서렬여GenBank공포(NM-003810)적일치.pshuttle-Egr1-hTRAIL용EcoR I、 Kpn I쌍매절중조득도대소위3540화4299bp적2개편단,용Sma I매절득도1517、2282화4040bp적3개편단,용BamH I매절득도3304화4535bp적2개편단,여예기결과완전일치.결론:성공극륭료hTRAIL기인,병구건료복사유도표체적선병독천사질립pshuttle-Egr1-hTRAIL.
