广东医学
廣東醫學
엄동의학
GUNAGDONG MEDICAL JOURNAL
2010年
19期
2508-2511
,共4页
刘学文%郎森阳%韩锟%田步先
劉學文%郎森暘%韓錕%田步先
류학문%랑삼양%한곤%전보선
W-7%NMDA%培养的神经元%LDH%p38MAPK
W-7%NMDA%培養的神經元%LDH%p38MAPK
W-7%NMDA%배양적신경원%LDH%p38MAPK
目的 观察钙调蛋白抑制剂W-7对NMDA诱导的体外培养的皮质神经元损伤的保护作用,并探讨药物作用机制.方法 取原代培养7 d的大鼠皮质神经元随机分为5组:(1)对照组:仅用DMEM/F12完全培养基.(2)NMDA组:去除正常神经元培养液,加入NMDA 50 μmol/L.(3)保护组:W-7低中高剂量,分别为25、50、100 μmol/L,加入NMDA 50 μmol/L.MTT法检测细胞存活力;试剂盒检测培养上清液中乳酸脱氢酶含量;用免疫细胞化学染色法检测皮质神经元内p38MAPK蛋白的表达.结果 (1)同对照组比较,NMDA组神经细胞存活力降低(P<0.01),W-7预处理组增加(P<0.05).(2)NMDA组培养上清液中LDH含量高于对照组,差异有显著性(P<0.01);W-7干预组LDH含量低于NMDA组,差异有显著性(P<0.05);(3)同对照组比较,NMDA组NF-κB蛋白表达增加(P<0.01);同NMDA组比较,W-7干预组表达减少,差异有显著性(P<0.05,P<0.01).结论 W-7可减轻NMDA对培养的皮质神经元的损伤,对皮质神经元具有保护作用.其作用是通过抑制NF-κB的蛋白表达实现的.
目的 觀察鈣調蛋白抑製劑W-7對NMDA誘導的體外培養的皮質神經元損傷的保護作用,併探討藥物作用機製.方法 取原代培養7 d的大鼠皮質神經元隨機分為5組:(1)對照組:僅用DMEM/F12完全培養基.(2)NMDA組:去除正常神經元培養液,加入NMDA 50 μmol/L.(3)保護組:W-7低中高劑量,分彆為25、50、100 μmol/L,加入NMDA 50 μmol/L.MTT法檢測細胞存活力;試劑盒檢測培養上清液中乳痠脫氫酶含量;用免疫細胞化學染色法檢測皮質神經元內p38MAPK蛋白的錶達.結果 (1)同對照組比較,NMDA組神經細胞存活力降低(P<0.01),W-7預處理組增加(P<0.05).(2)NMDA組培養上清液中LDH含量高于對照組,差異有顯著性(P<0.01);W-7榦預組LDH含量低于NMDA組,差異有顯著性(P<0.05);(3)同對照組比較,NMDA組NF-κB蛋白錶達增加(P<0.01);同NMDA組比較,W-7榦預組錶達減少,差異有顯著性(P<0.05,P<0.01).結論 W-7可減輕NMDA對培養的皮質神經元的損傷,對皮質神經元具有保護作用.其作用是通過抑製NF-κB的蛋白錶達實現的.
목적 관찰개조단백억제제W-7대NMDA유도적체외배양적피질신경원손상적보호작용,병탐토약물작용궤제.방법 취원대배양7 d적대서피질신경원수궤분위5조:(1)대조조:부용DMEM/F12완전배양기.(2)NMDA조:거제정상신경원배양액,가입NMDA 50 μmol/L.(3)보호조:W-7저중고제량,분별위25、50、100 μmol/L,가입NMDA 50 μmol/L.MTT법검측세포존활력;시제합검측배양상청액중유산탈경매함량;용면역세포화학염색법검측피질신경원내p38MAPK단백적표체.결과 (1)동대조조비교,NMDA조신경세포존활력강저(P<0.01),W-7예처리조증가(P<0.05).(2)NMDA조배양상청액중LDH함량고우대조조,차이유현저성(P<0.01);W-7간예조LDH함량저우NMDA조,차이유현저성(P<0.05);(3)동대조조비교,NMDA조NF-κB단백표체증가(P<0.01);동NMDA조비교,W-7간예조표체감소,차이유현저성(P<0.05,P<0.01).결론 W-7가감경NMDA대배양적피질신경원적손상,대피질신경원구유보호작용.기작용시통과억제NF-κB적단백표체실현적.