肝脏
肝髒
간장
CHINESE HEPATOLOGY
2010年
6期
417-421
,共5页
李磊%嵇小琴%李宜%高人焘
李磊%嵇小琴%李宜%高人燾
리뢰%혜소금%리의%고인도
乙型肝炎病毒%复制%感染性克隆%高压水注射%动物模型
乙型肝炎病毒%複製%感染性剋隆%高壓水註射%動物模型
을형간염병독%복제%감염성극륭%고압수주사%동물모형
目的 比较不同长度HBV感染性克隆复制能力的差异,为HBV复制相关研究提供依据.方法 采用分子克隆的方法体外分别扩增HBV基因组的相应片段,并进行连接,分别构建含1.1、1.2、1.3倍HBV基因组的可复制性克隆.体外转染Huh7细胞系评价抗原分泌和病毒复制情况,使用高压水注射建立急性感染小鼠模型评价病毒分泌情况以及抗原在小鼠肝脏内的表达情况.结果 所构建的克隆体外转染Huh-7细胞后均可分泌高浓度的HBsAg,而1.3倍HBV基因组的可复制性克隆HBeAg的分泌能力明显强于其他克隆,转录水平也最高.高压尾静脉注射小鼠后肝组织内均可检测到HBcAg的分布,血清中可以检测到HBV DNA并随时间发生动态变化.其蛋白表达水平和病毒分泌能力均以1.3倍HBV基因组的可复制性克隆较高.结论 所构建的克隆在体外及体内均可进行复制,其中含HBV全基因组1.3倍体的可复制性克隆的复制能力最强,可以较好反映来源病毒株的天然复制能力.
目的 比較不同長度HBV感染性剋隆複製能力的差異,為HBV複製相關研究提供依據.方法 採用分子剋隆的方法體外分彆擴增HBV基因組的相應片段,併進行連接,分彆構建含1.1、1.2、1.3倍HBV基因組的可複製性剋隆.體外轉染Huh7細胞繫評價抗原分泌和病毒複製情況,使用高壓水註射建立急性感染小鼠模型評價病毒分泌情況以及抗原在小鼠肝髒內的錶達情況.結果 所構建的剋隆體外轉染Huh-7細胞後均可分泌高濃度的HBsAg,而1.3倍HBV基因組的可複製性剋隆HBeAg的分泌能力明顯彊于其他剋隆,轉錄水平也最高.高壓尾靜脈註射小鼠後肝組織內均可檢測到HBcAg的分佈,血清中可以檢測到HBV DNA併隨時間髮生動態變化.其蛋白錶達水平和病毒分泌能力均以1.3倍HBV基因組的可複製性剋隆較高.結論 所構建的剋隆在體外及體內均可進行複製,其中含HBV全基因組1.3倍體的可複製性剋隆的複製能力最彊,可以較好反映來源病毒株的天然複製能力.
목적 비교불동장도HBV감염성극륭복제능력적차이,위HBV복제상관연구제공의거.방법 채용분자극륭적방법체외분별확증HBV기인조적상응편단,병진행련접,분별구건함1.1、1.2、1.3배HBV기인조적가복제성극륭.체외전염Huh7세포계평개항원분비화병독복제정황,사용고압수주사건립급성감염소서모형평개병독분비정황이급항원재소서간장내적표체정황.결과 소구건적극륭체외전염Huh-7세포후균가분비고농도적HBsAg,이1.3배HBV기인조적가복제성극륭HBeAg적분비능력명현강우기타극륭,전록수평야최고.고압미정맥주사소서후간조직내균가검측도HBcAg적분포,혈청중가이검측도HBV DNA병수시간발생동태변화.기단백표체수평화병독분비능력균이1.3배HBV기인조적가복제성극륭교고.결론 소구건적극륭재체외급체내균가진행복제,기중함HBV전기인조1.3배체적가복제성극륭적복제능력최강,가이교호반영래원병독주적천연복제능력.
