重庆医科大学学报
重慶醫科大學學報
중경의과대학학보
UNIVERSITATIS SCIENTIAE MEDICINAE CHONGQING
2011年
3期
290-293
,共4页
陈佳琳%张丽平%孙成铭%姚声涛%朱元方%赵宇
陳佳琳%張麗平%孫成銘%姚聲濤%硃元方%趙宇
진가림%장려평%손성명%요성도%주원방%조우
转录因子%增殖%凋亡%细胞周期%白血病
轉錄因子%增殖%凋亡%細胞週期%白血病
전록인자%증식%조망%세포주기%백혈병
目的:研究转录因子FOXO3a对急性粒细胞白血病HL60细胞株增殖、凋亡的影响及可能的分子机制.方法:将FOXO3a表达质粒pcDNA3.1-FOXO3a及空载对照质粒pcDNA3.1分别经阳离子脂质体介导转染HL60细胞,用G418筛选出FOXO3a稳定表达细胞株.台盼蓝拒染法和MTT法检测HL60细胞增殖,流式细胞仪分析细胞周期和凋亡,RT-PCR及Western blot方法检测基因Bim和bcl-2的表达.结果:筛选到稳定表达FOXO3a基因的细胞株HL60/FOXO3a细胞,与空载体转染组(HL60/empty)及未处理对照组(HL60/untreated)细胞相比,转染组FOXO3a明显抑制HL60细胞生长与增殖,导致G,期阻滞,细胞凋亡明显增加.RT-PCR及Western blot显示FOXO3a明显上调Bim基因的mRNA和蛋白表达,而抑制bcl-2基因mRNA和蛋白的表达.结论:FOXO3a转录因子能抑制HL60细胞的生长和增殖,并诱导其发生凋亡,其机制可能是通过对凋亡相关基因的调控并阻止细胞周期进程来实现的.
目的:研究轉錄因子FOXO3a對急性粒細胞白血病HL60細胞株增殖、凋亡的影響及可能的分子機製.方法:將FOXO3a錶達質粒pcDNA3.1-FOXO3a及空載對照質粒pcDNA3.1分彆經暘離子脂質體介導轉染HL60細胞,用G418篩選齣FOXO3a穩定錶達細胞株.檯盼藍拒染法和MTT法檢測HL60細胞增殖,流式細胞儀分析細胞週期和凋亡,RT-PCR及Western blot方法檢測基因Bim和bcl-2的錶達.結果:篩選到穩定錶達FOXO3a基因的細胞株HL60/FOXO3a細胞,與空載體轉染組(HL60/empty)及未處理對照組(HL60/untreated)細胞相比,轉染組FOXO3a明顯抑製HL60細胞生長與增殖,導緻G,期阻滯,細胞凋亡明顯增加.RT-PCR及Western blot顯示FOXO3a明顯上調Bim基因的mRNA和蛋白錶達,而抑製bcl-2基因mRNA和蛋白的錶達.結論:FOXO3a轉錄因子能抑製HL60細胞的生長和增殖,併誘導其髮生凋亡,其機製可能是通過對凋亡相關基因的調控併阻止細胞週期進程來實現的.
목적:연구전록인자FOXO3a대급성립세포백혈병HL60세포주증식、조망적영향급가능적분자궤제.방법:장FOXO3a표체질립pcDNA3.1-FOXO3a급공재대조질립pcDNA3.1분별경양리자지질체개도전염HL60세포,용G418사선출FOXO3a은정표체세포주.태반람거염법화MTT법검측HL60세포증식,류식세포의분석세포주기화조망,RT-PCR급Western blot방법검측기인Bim화bcl-2적표체.결과:사선도은정표체FOXO3a기인적세포주HL60/FOXO3a세포,여공재체전염조(HL60/empty)급미처리대조조(HL60/untreated)세포상비,전염조FOXO3a명현억제HL60세포생장여증식,도치G,기조체,세포조망명현증가.RT-PCR급Western blot현시FOXO3a명현상조Bim기인적mRNA화단백표체,이억제bcl-2기인mRNA화단백적표체.결론:FOXO3a전록인자능억제HL60세포적생장화증식,병유도기발생조망,기궤제가능시통과대조망상관기인적조공병조지세포주기진정래실현적.
