温州医学院学报
溫州醫學院學報
온주의학원학보
JOURNAL OF WENZHOU MEDICAL COLLEGE
2011年
6期
520-522
,共3页
郑晓云%李丽宁%谭峰%梁韶晖
鄭曉雲%李麗寧%譚峰%樑韶暉
정효운%리려저%담봉%량소휘
刚地弓形虫%三磷酸核苷水解酶基因%真核表达
剛地弓形蟲%三燐痠覈苷水解酶基因%真覈錶達
강지궁형충%삼린산핵감수해매기인%진핵표체
目的:构建编码弓形虫RH株三磷酸核苷水解酶(NTPase -Ⅱ)重组真核表达载体PVAX1-NTPase-Ⅱ.方法:采用PCR从弓形虫基因组DNA中扩增NTPase -Ⅱ基因,克隆入pGEM-T Easy载体,并对重组入外源基因的质粒通过PCR、酶切和测序鉴定;采用亚克隆将NTPase -Ⅱ基因克隆至真核表达载体PVAX1,筛选阳性重组质粒PVAX1 -NTPase-Ⅱ,进行PCR、酶切和测序鉴定.结果:NTPase-Ⅱ的重组真核表达载体经PCR、酶切和测序鉴定,大小为1887 bp,与预期大小一致;重组真核表达载体的核苷酸序列,与GenBank中的相应序列100%同源.结论:成功构建重组真核表达载体PVAX1 -NTPase-Ⅱ,为弓形虫核酸疫苗的研制奠定了基础.
目的:構建編碼弓形蟲RH株三燐痠覈苷水解酶(NTPase -Ⅱ)重組真覈錶達載體PVAX1-NTPase-Ⅱ.方法:採用PCR從弓形蟲基因組DNA中擴增NTPase -Ⅱ基因,剋隆入pGEM-T Easy載體,併對重組入外源基因的質粒通過PCR、酶切和測序鑒定;採用亞剋隆將NTPase -Ⅱ基因剋隆至真覈錶達載體PVAX1,篩選暘性重組質粒PVAX1 -NTPase-Ⅱ,進行PCR、酶切和測序鑒定.結果:NTPase-Ⅱ的重組真覈錶達載體經PCR、酶切和測序鑒定,大小為1887 bp,與預期大小一緻;重組真覈錶達載體的覈苷痠序列,與GenBank中的相應序列100%同源.結論:成功構建重組真覈錶達載體PVAX1 -NTPase-Ⅱ,為弓形蟲覈痠疫苗的研製奠定瞭基礎.
목적:구건편마궁형충RH주삼린산핵감수해매(NTPase -Ⅱ)중조진핵표체재체PVAX1-NTPase-Ⅱ.방법:채용PCR종궁형충기인조DNA중확증NTPase -Ⅱ기인,극륭입pGEM-T Easy재체,병대중조입외원기인적질립통과PCR、매절화측서감정;채용아극륭장NTPase -Ⅱ기인극륭지진핵표체재체PVAX1,사선양성중조질립PVAX1 -NTPase-Ⅱ,진행PCR、매절화측서감정.결과:NTPase-Ⅱ적중조진핵표체재체경PCR、매절화측서감정,대소위1887 bp,여예기대소일치;중조진핵표체재체적핵감산서렬,여GenBank중적상응서렬100%동원.결론:성공구건중조진핵표체재체PVAX1 -NTPase-Ⅱ,위궁형충핵산역묘적연제전정료기출.
