中华微生物学和免疫学杂志
中華微生物學和免疫學雜誌
중화미생물학화면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF MICROBIOLOGY AND IMMUNOLOGY
2000年
3期
253-257
,共5页
主要组织相容性复合物%绿色荧光蛋白%融合分子
主要組織相容性複閤物%綠色熒光蛋白%融閤分子
주요조직상용성복합물%록색형광단백%융합분자
目的 构建GFP与H-2Kb融合基因,并分析融合基因在活细胞中的表达.方法 应用基因工程技术构建H-2Kb与绿色荧光蛋白(GFP)的融合基因.RT-PCR和Western印迹分析基因表达;激光共聚焦荧光显微镜观察活细胞内荧光布局.结果 RT-PCR和Western印迹分析表明融合基因获得了正确表达.激光共聚焦荧光显微镜观察结果表明,Kb-GFP融合分子象天然Kb分子一样表达在细胞膜表面,且胞外区域可被Kb分子特异性单克隆抗体所识别,表明Kb-GFP融合分子可在细胞内正确折叠和装配.Kb-GFP融合基因的瞬间和稳定表达均获得了相同结果.结论 Kb-GFP融合蛋白具有GFP的自发荧光特性,且不影响Kb分子在细胞内的正确表达.
目的 構建GFP與H-2Kb融閤基因,併分析融閤基因在活細胞中的錶達.方法 應用基因工程技術構建H-2Kb與綠色熒光蛋白(GFP)的融閤基因.RT-PCR和Western印跡分析基因錶達;激光共聚焦熒光顯微鏡觀察活細胞內熒光佈跼.結果 RT-PCR和Western印跡分析錶明融閤基因穫得瞭正確錶達.激光共聚焦熒光顯微鏡觀察結果錶明,Kb-GFP融閤分子象天然Kb分子一樣錶達在細胞膜錶麵,且胞外區域可被Kb分子特異性單剋隆抗體所識彆,錶明Kb-GFP融閤分子可在細胞內正確摺疊和裝配.Kb-GFP融閤基因的瞬間和穩定錶達均穫得瞭相同結果.結論 Kb-GFP融閤蛋白具有GFP的自髮熒光特性,且不影響Kb分子在細胞內的正確錶達.
목적 구건GFP여H-2Kb융합기인,병분석융합기인재활세포중적표체.방법 응용기인공정기술구건H-2Kb여록색형광단백(GFP)적융합기인.RT-PCR화Western인적분석기인표체;격광공취초형광현미경관찰활세포내형광포국.결과 RT-PCR화Western인적분석표명융합기인획득료정학표체.격광공취초형광현미경관찰결과표명,Kb-GFP융합분자상천연Kb분자일양표체재세포막표면,차포외구역가피Kb분자특이성단극륭항체소식별,표명Kb-GFP융합분자가재세포내정학절첩화장배.Kb-GFP융합기인적순간화은정표체균획득료상동결과.결론 Kb-GFP융합단백구유GFP적자발형광특성,차불영향Kb분자재세포내적정학표체.
