中华血液学杂志
中華血液學雜誌
중화혈액학잡지
Chinese Journal of Hematology
2008年
2期
101-104
,共4页
郑璐%马泓冰%戚春建%董秋明%张学光
鄭璐%馬泓冰%慼春建%董鞦明%張學光
정로%마홍빙%척춘건%동추명%장학광
RPMI8226细胞%抗体,CD40%CD40配体%DNA突变分析
RPMI8226細胞%抗體,CD40%CD40配體%DNA突變分析
RPMI8226세포%항체,CD40%CD40배체%DNA돌변분석
目的 分析CD40抗体或配体不同形式刺激对RPMI8226细胞增殖及表面共刺激分子和黏附分子表达的影响,探讨RPMI8226细胞CD40基因突变在其生物学行为中的作用.方法 用RT-PCR方法和DNA序列测定检测RPMI8226细胞CD40基因突变体,分析RPMI8226细胞经CD40抗体或配体四种不同方式(CD40单抗、CD40单抗包板、rhsCD40L和CD40L转基因细胞)刺激后,其体外生长曲线、细胞表型及细胞周期的变化,并利用激光共聚焦显微镜对RPMI8226细胞表面CD40信号转导体的形成进行初步分析.结果 RPMI8226细胞表达CD40突变体(TCA→TTA,Ser→Leu),但是该点突变并未影响hmuCD40的抗原表位.三种激发CD40活化的分子(CD40单抗、rhsCD40L和CD40L转基因细胞)并不影响RPMI8226细胞的体外增殖,但是CD40单抗包板能明显抑制RPMI8226细胞的增殖[(2.5±0.6)×105 vs (7.8±1.2)×105,P＜0.05],并产生明显的G1期阻滞[(58.0±3.6)% vs (42.0±2.3)%,P＜0.05].RPMI8226细胞上黏附分子和共刺激分子的表达无明显变化.激光共聚焦显微镜分析结果显示,在CD40被激活后能形成CD40信号传导的复合体.结论 RPMI8226细胞高表达一种CD40基因突变体,该突变体能在被激活后形成相应的信号传导复合体.
目的 分析CD40抗體或配體不同形式刺激對RPMI8226細胞增殖及錶麵共刺激分子和黏附分子錶達的影響,探討RPMI8226細胞CD40基因突變在其生物學行為中的作用.方法 用RT-PCR方法和DNA序列測定檢測RPMI8226細胞CD40基因突變體,分析RPMI8226細胞經CD40抗體或配體四種不同方式(CD40單抗、CD40單抗包闆、rhsCD40L和CD40L轉基因細胞)刺激後,其體外生長麯線、細胞錶型及細胞週期的變化,併利用激光共聚焦顯微鏡對RPMI8226細胞錶麵CD40信號轉導體的形成進行初步分析.結果 RPMI8226細胞錶達CD40突變體(TCA→TTA,Ser→Leu),但是該點突變併未影響hmuCD40的抗原錶位.三種激髮CD40活化的分子(CD40單抗、rhsCD40L和CD40L轉基因細胞)併不影響RPMI8226細胞的體外增殖,但是CD40單抗包闆能明顯抑製RPMI8226細胞的增殖[(2.5±0.6)×105 vs (7.8±1.2)×105,P＜0.05],併產生明顯的G1期阻滯[(58.0±3.6)% vs (42.0±2.3)%,P＜0.05].RPMI8226細胞上黏附分子和共刺激分子的錶達無明顯變化.激光共聚焦顯微鏡分析結果顯示,在CD40被激活後能形成CD40信號傳導的複閤體.結論 RPMI8226細胞高錶達一種CD40基因突變體,該突變體能在被激活後形成相應的信號傳導複閤體.
목적 분석CD40항체혹배체불동형식자격대RPMI8226세포증식급표면공자격분자화점부분자표체적영향,탐토RPMI8226세포CD40기인돌변재기생물학행위중적작용.방법 용RT-PCR방법화DNA서렬측정검측RPMI8226세포CD40기인돌변체,분석RPMI8226세포경CD40항체혹배체사충불동방식(CD40단항、CD40단항포판、rhsCD40L화CD40L전기인세포)자격후,기체외생장곡선、세포표형급세포주기적변화,병이용격광공취초현미경대RPMI8226세포표면CD40신호전도체적형성진행초보분석.결과 RPMI8226세포표체CD40돌변체(TCA→TTA,Ser→Leu),단시해점돌변병미영향hmuCD40적항원표위.삼충격발CD40활화적분자(CD40단항、rhsCD40L화CD40L전기인세포)병불영향RPMI8226세포적체외증식,단시CD40단항포판능명현억제RPMI8226세포적증식[(2.5±0.6)×105 vs (7.8±1.2)×105,P＜0.05],병산생명현적G1기조체[(58.0±3.6)% vs (42.0±2.3)%,P＜0.05].RPMI8226세포상점부분자화공자격분자적표체무명현변화.격광공취초현미경분석결과현시,재CD40피격활후능형성CD40신호전도적복합체.결론 RPMI8226세포고표체일충CD40기인돌변체,해돌변체능재피격활후형성상응적신호전도복합체.
