高校化学工程学报
高校化學工程學報
고교화학공정학보
JOURNAL OF CHEMICAL ENGINEERING OF CHINESE UNIVERSITIES
2005年
3期
349-355
,共7页
李家璜%李苏平%严明%欧阳平凯
李傢璜%李囌平%嚴明%歐暘平凱
리가황%리소평%엄명%구양평개
D-海因酶%Burkholderia cepecia%纯化%酶学性质
D-海因酶%Burkholderia cepecia%純化%酶學性質
D-해인매%Burkholderia cepecia%순화%매학성질
经过硫酸铵分级沉淀、热处理、HiPrepTM Phenyl FF (high sub)疏水层析、DEAE Fastflow离子交换层析以及Sephadex G-200凝胶过滤,从Burkholderia cepecia.njut1中得到了海因酶,收率8.98%,纯化倍数为69.Burkholderia cepecia njut1海因酶是同源四聚体,亚基分子量52ku,等电点是5.09,具有严格的光学选择性,是D-型海因酶,并具有较广泛的底物适应性,对苄基海因和对羟苯海因有较高的亲和力.Burkholderia cepecia. njut1海因酶的最适催化的pH值为9.0. 酶在pH 6.5~10.0下稳定. 60℃时酶活力较高,但在此温度下酶的热稳定性较差.Burkholderia cepecia. njut1海因酶是金属依赖性酶,金属螯合剂EDTA对海因酶有抑制作用.二价金属离子对酶有较大的影响.
經過硫痠銨分級沉澱、熱處理、HiPrepTM Phenyl FF (high sub)疏水層析、DEAE Fastflow離子交換層析以及Sephadex G-200凝膠過濾,從Burkholderia cepecia.njut1中得到瞭海因酶,收率8.98%,純化倍數為69.Burkholderia cepecia njut1海因酶是同源四聚體,亞基分子量52ku,等電點是5.09,具有嚴格的光學選擇性,是D-型海因酶,併具有較廣汎的底物適應性,對芐基海因和對羥苯海因有較高的親和力.Burkholderia cepecia. njut1海因酶的最適催化的pH值為9.0. 酶在pH 6.5~10.0下穩定. 60℃時酶活力較高,但在此溫度下酶的熱穩定性較差.Burkholderia cepecia. njut1海因酶是金屬依賴性酶,金屬螯閤劑EDTA對海因酶有抑製作用.二價金屬離子對酶有較大的影響.
경과류산안분급침정、열처리、HiPrepTM Phenyl FF (high sub)소수층석、DEAE Fastflow리자교환층석이급Sephadex G-200응효과려,종Burkholderia cepecia.njut1중득도료해인매,수솔8.98%,순화배수위69.Burkholderia cepecia njut1해인매시동원사취체,아기분자량52ku,등전점시5.09,구유엄격적광학선택성,시D-형해인매,병구유교엄범적저물괄응성,대변기해인화대간분해인유교고적친화력.Burkholderia cepecia. njut1해인매적최괄최화적pH치위9.0. 매재pH 6.5~10.0하은정. 60℃시매활력교고,단재차온도하매적열은정성교차.Burkholderia cepecia. njut1해인매시금속의뢰성매,금속오합제EDTA대해인매유억제작용.이개금속리자대매유교대적영향.