CAJ | 학술논문

周围神经再生条件液中蛋白条带质谱分析
주위신경재생조건액중단백조대질보분석
ANALYSIS OF PROTEIN BAND IN PERIPHERAL NERVE REGENERATION CONDITIONED FLUID BY SHOTGUN TECHNIQUE

万方数据

中国修复重建外科杂志中國脩複重建外科雜誌 중국수복중건외과잡지
CHINESE JOURNAL OF REPARATIVE AND RECONSTRUCTIVE SURGERY
2007年 6期 596-599 ,共4页

李玉萍%姜浩%李青峰%王会勇%汤璐佳%郑胜武%刘琴秀%昝涛%谢芸%陈瑜%郑丹宁

리옥평%강호%리청봉%왕회용%탕로가%정성무%류금수%잠도%사예%진유%정단저

神经再生条件液%自然聚丙烯酰胺凝胶电泳%Shotgun蛋白质组学%质谱分析%兔神經再生條件液%自然聚丙烯酰胺凝膠電泳%Shotgun蛋白質組學%質譜分析%兔
신경재생조건액%자연취병희선알응효전영%Shotgun단백질조학%질보분석%토

目的研究神经再生条件液(nerve regeneration conditioned fluid, NRCF)中具有神经再生趋化活性的蛋白成分,对相对分子质量为(232～440)×103的蛋白条带进一步行分离和定性.方法新西兰大白兔6只,体重1.8～2.5 kg,取坐骨神经建立神经再生室模型.术后7 d采集NRCF进行自然聚丙烯酰胺凝胶电泳(native-polyacrylamide gel electrophoresis,Native-PAGE)分离,切取相对分子质量为(232～440)×103区域的蛋白条带,采用Shotgun蛋白质组学策略、液相色谱-串联质谱对其组分进行定性分析.结果 NRCF的Native-PAGE电泳结果显示,相对分子质量在669×103以上、(232～440)×103和(140～232)×103分别有1条蛋白带,在(67～140)×103有6条蛋白带.其中相对分子质量在(232～440)×103的蛋白条带共鉴定到54种蛋白质,主要集中在等电点5.5～8.0,相对分子质量为(10～40)×103范围内,其中4种是未命名蛋白质.这54种蛋白质可归类为结合蛋白(43%)、转运蛋白(30%)、酶(6%)、信号转导蛋白(4%)和分子功能未知(17%).54种蛋白质的亚细胞定位主要是分泌性蛋白(63%),其他的位于细胞膜和胞浆内等.结论采用Native-PAGE和Shotgun蛋白质组学分析NRCF中相关蛋白质,确定了NRCF中相对分子质量为(232～440)×103条带的蛋白质组分,为进一步研究其中的功能未知蛋白提供了线索,对明确其是否对周围神经再生具有促进作用.
목적 연구신경재생조건액(nerve regeneration conditioned fluid, NRCF)중구유신경재생추화활성적단백성분,대상대분자질량위(232～440)×103적단백조대진일보행분리화정성.방법 신서란대백토6지,체중1.8～2.5 kg,취좌골신경건립신경재생실모형.술후7 d채집NRCF진행자연취병희선알응효전영(native-polyacrylamide gel electrophoresis,Native-PAGE)분리,절취상대분자질량위(232～440)×103구역적단백조대,채용Shotgun단백질조학책략、액상색보-천련질보대기조분진행정성분석.결과 NRCF적Native-PAGE전영결과현시,상대분자질량재669×103이상、(232～440)×103화(140～232)×103분별유1조단백대,재(67～140)×103유6조단백대.기중상대분자질량재(232～440)×103적단백조대공감정도54충단백질,주요집중재등전점5.5～8.0,상대분자질량위(10～40)×103범위내,기중4충시미명명단백질.저54충단백질가귀류위결합단백(43%)、전운단백(30%)、매(6%)、신호전도단백(4%)화분자공능미지(17%).54충단백질적아세포정위주요시분비성단백(63%),기타적위우세포막화포장내등.결론 채용Native-PAGE화Shotgun단백질조학분석NRCF중상관단백질,학정료NRCF중상대분자질량위(232～440)×103조대적단백질조분,위진일보연구기중적공능미지단백제공료선색,대명학기시부대주위신경재생구유촉진작용.