畜牧兽医学报
畜牧獸醫學報
축목수의학보
2008年
3期
309-313
,共5页
赵永贞%肖邦%张兴举%唐中林%崔文涛%杨述林%李奎
趙永貞%肖邦%張興舉%唐中林%崔文濤%楊述林%李奎
조영정%초방%장흥거%당중림%최문도%양술림%리규
RecA蛋白%显微注射%ssDNA%转基因
RecA蛋白%顯微註射%ssDNA%轉基因
RecA단백%현미주사%ssDNA%전기인
受精卵原核内核酸酶对外源基因的降解是导致显微注射法制备转基因动物效率低的重要原因之一,RecA蛋白可与单链DNA结合而阻止细胞核内核酸酶对单链DNA的降解.本试验建立了显微注射和RecA蛋白结合制备转基因动物的技术模型,并初步探讨了RecA蛋白对显微注射法制备转基因动物效率的影响.以单链DNA、RecA蛋白与单链DNA的复合体以及双链DNA为外源基因进行受精卵原核显微注射转基因试验,分别获得F0代小鼠28、41和32只,并通过 PCR 和Southern blot进行了转基因鉴定.结果显示,在小鼠受精卵原核显微注射 Re-Ca+ssDNA 复合体获得的F0代中 14.6%(6/41)为转基因个体,显微注射 dsDNA 获得的F0代中转基因个体占6.2%(2/32),而显微注射 ssDNA 获得的F0代中无一为转基因个体.
受精卵原覈內覈痠酶對外源基因的降解是導緻顯微註射法製備轉基因動物效率低的重要原因之一,RecA蛋白可與單鏈DNA結閤而阻止細胞覈內覈痠酶對單鏈DNA的降解.本試驗建立瞭顯微註射和RecA蛋白結閤製備轉基因動物的技術模型,併初步探討瞭RecA蛋白對顯微註射法製備轉基因動物效率的影響.以單鏈DNA、RecA蛋白與單鏈DNA的複閤體以及雙鏈DNA為外源基因進行受精卵原覈顯微註射轉基因試驗,分彆穫得F0代小鼠28、41和32隻,併通過 PCR 和Southern blot進行瞭轉基因鑒定.結果顯示,在小鼠受精卵原覈顯微註射 Re-Ca+ssDNA 複閤體穫得的F0代中 14.6%(6/41)為轉基因箇體,顯微註射 dsDNA 穫得的F0代中轉基因箇體佔6.2%(2/32),而顯微註射 ssDNA 穫得的F0代中無一為轉基因箇體.
수정란원핵내핵산매대외원기인적강해시도치현미주사법제비전기인동물효솔저적중요원인지일,RecA단백가여단련DNA결합이조지세포핵내핵산매대단련DNA적강해.본시험건립료현미주사화RecA단백결합제비전기인동물적기술모형,병초보탐토료RecA단백대현미주사법제비전기인동물효솔적영향.이단련DNA、RecA단백여단련DNA적복합체이급쌍련DNA위외원기인진행수정란원핵현미주사전기인시험,분별획득F0대소서28、41화32지,병통과 PCR 화Southern blot진행료전기인감정.결과현시,재소서수정란원핵현미주사 Re-Ca+ssDNA 복합체획득적F0대중 14.6%(6/41)위전기인개체,현미주사 dsDNA 획득적F0대중전기인개체점6.2%(2/32),이현미주사 ssDNA 획득적F0대중무일위전기인개체.
