细胞与分子免疫学杂志
細胞與分子免疫學雜誌
세포여분자면역학잡지
2008年
9期
864-866
,共3页
韩苏夏%马瑾璐%吕毅%黄辰%段康民
韓囌夏%馬瑾璐%呂毅%黃辰%段康民
한소하%마근로%려의%황신%단강민
信号肽%蛋白转导域%鸡贫血病毒%Apoptin蛋白%肝癌
信號肽%蛋白轉導域%鷄貧血病毒%Apoptin蛋白%肝癌
신호태%단백전도역%계빈혈병독%Apoptin단백%간암
目的: 研究SP-TAT-Apoptin融合基因诱导人肝癌HepG2细胞凋亡和细胞周期阻滞, 探讨其用于肝癌治疗的可能性.方法: 通过DNA重组技术, 以pcDNA3.1/Apoptin质粒11为模板, 构建SP-TAT-Apoptin融合基因 plenti6-V5-D-TOPO真核表达载体.用SP-TAT-Apoptinplenti6-V5-D-TOPO真核表达载体转染中国仓鼠卵巢细胞(CHO), 转染后Blasticidin霉素进行筛选, 并进行鉴定得到稳定表达SP-TAT-Apoptin的CHO细胞株.收集含有TAT-Apoptin融合蛋白的筛选细胞培养上清, 用于HepG2细胞培养.于共培养后的不同时段收集HepG2细胞, 流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡和细胞周期.结果: 用包含SP-TAT-Apoptin融合基因的plenti6-V5-D-TOPO真核表达载体瞬时转染中国仓鼠卵巢细胞(CHO), 成功筛选出稳定表达SP-TAT-Apoptin融合蛋白的CHO细胞, 收集细胞培养上清, 继续用于HepG2细胞培养, 可观察到HepG2细胞阻滞于G1期并引起细胞凋亡.结论: SP-TAT-Apoptin融合表达可引起HepG2细胞的细胞周期G1期阻滞.
目的: 研究SP-TAT-Apoptin融閤基因誘導人肝癌HepG2細胞凋亡和細胞週期阻滯, 探討其用于肝癌治療的可能性.方法: 通過DNA重組技術, 以pcDNA3.1/Apoptin質粒11為模闆, 構建SP-TAT-Apoptin融閤基因 plenti6-V5-D-TOPO真覈錶達載體.用SP-TAT-Apoptinplenti6-V5-D-TOPO真覈錶達載體轉染中國倉鼠卵巢細胞(CHO), 轉染後Blasticidin黴素進行篩選, 併進行鑒定得到穩定錶達SP-TAT-Apoptin的CHO細胞株.收集含有TAT-Apoptin融閤蛋白的篩選細胞培養上清, 用于HepG2細胞培養.于共培養後的不同時段收集HepG2細胞, 流式細胞術(FCM)檢測細胞凋亡和細胞週期.結果: 用包含SP-TAT-Apoptin融閤基因的plenti6-V5-D-TOPO真覈錶達載體瞬時轉染中國倉鼠卵巢細胞(CHO), 成功篩選齣穩定錶達SP-TAT-Apoptin融閤蛋白的CHO細胞, 收集細胞培養上清, 繼續用于HepG2細胞培養, 可觀察到HepG2細胞阻滯于G1期併引起細胞凋亡.結論: SP-TAT-Apoptin融閤錶達可引起HepG2細胞的細胞週期G1期阻滯.
목적: 연구SP-TAT-Apoptin융합기인유도인간암HepG2세포조망화세포주기조체, 탐토기용우간암치료적가능성.방법: 통과DNA중조기술, 이pcDNA3.1/Apoptin질립11위모판, 구건SP-TAT-Apoptin융합기인 plenti6-V5-D-TOPO진핵표체재체.용SP-TAT-Apoptinplenti6-V5-D-TOPO진핵표체재체전염중국창서란소세포(CHO), 전염후Blasticidin매소진행사선, 병진행감정득도은정표체SP-TAT-Apoptin적CHO세포주.수집함유TAT-Apoptin융합단백적사선세포배양상청, 용우HepG2세포배양.우공배양후적불동시단수집HepG2세포, 류식세포술(FCM)검측세포조망화세포주기.결과: 용포함SP-TAT-Apoptin융합기인적plenti6-V5-D-TOPO진핵표체재체순시전염중국창서란소세포(CHO), 성공사선출은정표체SP-TAT-Apoptin융합단백적CHO세포, 수집세포배양상청, 계속용우HepG2세포배양, 가관찰도HepG2세포조체우G1기병인기세포조망.결론: SP-TAT-Apoptin융합표체가인기HepG2세포적세포주기G1기조체.
