中国医药生物技术
中國醫藥生物技術
중국의약생물기술
CHINESE MEDICINAL BIOTECHNOLOGY
2008年
5期
361-365
,共5页
β淀粉酶%发酵%耐高温
β澱粉酶%髮酵%耐高溫
β정분매%발효%내고온
目的 筛选高产微生物β淀粉酶的优良菌株,通过微生物发酵法制备微生物β淀粉酶.方法 从南宁明阳生化淀粉厂附近的土壤分离出枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)原始菌株,取10 g土样制成稀释100-2～10-4的倍,平面涂布,单菌落平面纯培养后,纯化选得产β淀粉酶原始菌株,鉴定为枯草芽孢杆菌(命名为NKJ-00),采用NTG诱变法对枯草芽孢杆菌诱变得突变株,过滤、离心得β淀粉酶粗酶液,采用硫酸铵沉淀法纯化:用蒸馏水代替酶液作为对照组.测定β淀粉酶的酶活力,且对其最适温度、熟稳定性、pH的稳定性和金属离子对其的影响等酶学性质进行了测定;最后对β淀粉酶转化可溶性淀粉溶液制备麦芽糖的能力进行了测定.结果 枯草芽孢杆菌原始菌株产酶能力为220～230 U/ml,得到的4株突变株产酶活力远高于原始菌株,其中NJK-05产酶能力及稳定性最佳,传6代后发酵产酶能力稳定在1500 U/ml以上.用NKJ-05菌株发酵制得耐高温微生物β淀粉酶,酶最适温度60～65℃,酶活力为2.2万U/ml,50～65℃是稳定的,pH 5～8时相对稳定.pH>8相对酶活下降较明显,pH<5时,相对酶活迅速下降:金属离子对β淀粉酶活性有一定的抑制.提取纯化后的β淀粉酶作用于22%～25%的可溶性淀粉溶液得到60%～70%的麦芽糖浆.结论 β淀粉酶可通过微生物发酵法生产,微生物β淀粉酶的稳定性、耐高温等指标均超过植物β淀粉酶,纯度基本上达到工业生产的要求.
目的 篩選高產微生物β澱粉酶的優良菌株,通過微生物髮酵法製備微生物β澱粉酶.方法 從南寧明暘生化澱粉廠附近的土壤分離齣枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)原始菌株,取10 g土樣製成稀釋100-2～10-4的倍,平麵塗佈,單菌落平麵純培養後,純化選得產β澱粉酶原始菌株,鑒定為枯草芽孢桿菌(命名為NKJ-00),採用NTG誘變法對枯草芽孢桿菌誘變得突變株,過濾、離心得β澱粉酶粗酶液,採用硫痠銨沉澱法純化:用蒸餾水代替酶液作為對照組.測定β澱粉酶的酶活力,且對其最適溫度、熟穩定性、pH的穩定性和金屬離子對其的影響等酶學性質進行瞭測定;最後對β澱粉酶轉化可溶性澱粉溶液製備麥芽糖的能力進行瞭測定.結果 枯草芽孢桿菌原始菌株產酶能力為220～230 U/ml,得到的4株突變株產酶活力遠高于原始菌株,其中NJK-05產酶能力及穩定性最佳,傳6代後髮酵產酶能力穩定在1500 U/ml以上.用NKJ-05菌株髮酵製得耐高溫微生物β澱粉酶,酶最適溫度60～65℃,酶活力為2.2萬U/ml,50～65℃是穩定的,pH 5～8時相對穩定.pH>8相對酶活下降較明顯,pH<5時,相對酶活迅速下降:金屬離子對β澱粉酶活性有一定的抑製.提取純化後的β澱粉酶作用于22%～25%的可溶性澱粉溶液得到60%～70%的麥芽糖漿.結論 β澱粉酶可通過微生物髮酵法生產,微生物β澱粉酶的穩定性、耐高溫等指標均超過植物β澱粉酶,純度基本上達到工業生產的要求.
목적 사선고산미생물β정분매적우량균주,통과미생물발효법제비미생물β정분매.방법 종남저명양생화정분엄부근적토양분리출고초아포간균(Bacillus subtilis)원시균주,취10 g토양제성희석100-2～10-4적배,평면도포,단균락평면순배양후,순화선득산β정분매원시균주,감정위고초아포간균(명명위NKJ-00),채용NTG유변법대고초아포간균유변득돌변주,과려、리심득β정분매조매액,채용류산안침정법순화:용증류수대체매액작위대조조.측정β정분매적매활력,차대기최괄온도、숙은정성、pH적은정성화금속리자대기적영향등매학성질진행료측정;최후대β정분매전화가용성정분용액제비맥아당적능력진행료측정.결과 고초아포간균원시균주산매능력위220～230 U/ml,득도적4주돌변주산매활력원고우원시균주,기중NJK-05산매능력급은정성최가,전6대후발효산매능력은정재1500 U/ml이상.용NKJ-05균주발효제득내고온미생물β정분매,매최괄온도60～65℃,매활력위2.2만U/ml,50～65℃시은정적,pH 5～8시상대은정.pH>8상대매활하강교명현,pH<5시,상대매활신속하강:금속리자대β정분매활성유일정적억제.제취순화후적β정분매작용우22%～25%적가용성정분용액득도60%～70%적맥아당장.결론 β정분매가통과미생물발효법생산,미생물β정분매적은정성、내고온등지표균초과식물β정분매,순도기본상체도공업생산적요구.
