中国普外基础与临床杂志
中國普外基礎與臨床雜誌
중국보외기출여림상잡지
CHINESE JOURNAL OF BASES AND CLINICS IN GENERAL SURGERY
2010年
1期
52-56
,共5页
邵磊%周书春%徐桂萍%孔宏亮
邵磊%週書春%徐桂萍%孔宏亮
소뢰%주서춘%서계평%공굉량
大鼠%骨髓间充质干细胞%Akt基因转染%缺氧%氚标-脱氧葡萄糖摄取%葡萄糖转运载体-4
大鼠%骨髓間充質榦細胞%Akt基因轉染%缺氧%氚標-脫氧葡萄糖攝取%葡萄糖轉運載體-4
대서%골수간충질간세포%Akt기인전염%결양%천표-탈양포도당섭취%포도당전운재체-4
目的 探讨葡萄糖转运载体(GLUT)-4是否参与骨髓间充质干细胞(MSCs)的葡萄糖转运以及Akt基因转染提高MSCs耐缺氧能力是否与GLUT-4易位和表达有关.方法 将经Akt基因转染和未转染的MSCs均行常氧(5% CO2)和缺氧(94% N2、1%O2和5%CO2)37 ℃孵育8 h.放射同位素法检测氚标-脱氧葡萄糖(3 H-G)的摄取量,免疫细胞化学染色、Western blot和RT-PCR分别检测GLUT-4的蛋白质和mRNA表达.结果 ①缺氧转染组的3 H-G摄取量是缺氧非转染组的(1.39±0.13)倍(P＜0.05),但仍低于常氧非转染组(P＜0.05).②MSCs在常氧或缺氧、Akt基因转染或无转染的条件下均可表达GLUT-4蛋白.与常氧非转染组比较,缺氧非转染组GLUT-4 mRNA和蛋白的表达水平明显降低(P＜0.05).③与缺氧非转染组比较,缺氧转染组的GLUT-4 mRNA[(1.756±0.152)倍]和蛋白[细胞总GLUT-4蛋白(1.653±0.312)倍,细胞膜GLUT-4蛋白(2.041±0.258)倍]的表达水平明显提高(P＜0.05),且GLUT-4蛋白易位明显;但与常氧非转染组比较,其GLUT-4 mRNA和蛋白的表达水平仍较低(P＜0.05).④MSCs的3 H-G摄取量与细胞膜中GLUT-4蛋白的表达呈正相关(r=0.415,P=0.001).结论 GLUT-4可能参与MSCs的葡萄糖转运,Akt基因提高MSCs耐缺氧能力可能与提高GLUT-4的表达和易位有关.
目的 探討葡萄糖轉運載體(GLUT)-4是否參與骨髓間充質榦細胞(MSCs)的葡萄糖轉運以及Akt基因轉染提高MSCs耐缺氧能力是否與GLUT-4易位和錶達有關.方法 將經Akt基因轉染和未轉染的MSCs均行常氧(5% CO2)和缺氧(94% N2、1%O2和5%CO2)37 ℃孵育8 h.放射同位素法檢測氚標-脫氧葡萄糖(3 H-G)的攝取量,免疫細胞化學染色、Western blot和RT-PCR分彆檢測GLUT-4的蛋白質和mRNA錶達.結果 ①缺氧轉染組的3 H-G攝取量是缺氧非轉染組的(1.39±0.13)倍(P＜0.05),但仍低于常氧非轉染組(P＜0.05).②MSCs在常氧或缺氧、Akt基因轉染或無轉染的條件下均可錶達GLUT-4蛋白.與常氧非轉染組比較,缺氧非轉染組GLUT-4 mRNA和蛋白的錶達水平明顯降低(P＜0.05).③與缺氧非轉染組比較,缺氧轉染組的GLUT-4 mRNA[(1.756±0.152)倍]和蛋白[細胞總GLUT-4蛋白(1.653±0.312)倍,細胞膜GLUT-4蛋白(2.041±0.258)倍]的錶達水平明顯提高(P＜0.05),且GLUT-4蛋白易位明顯;但與常氧非轉染組比較,其GLUT-4 mRNA和蛋白的錶達水平仍較低(P＜0.05).④MSCs的3 H-G攝取量與細胞膜中GLUT-4蛋白的錶達呈正相關(r=0.415,P=0.001).結論 GLUT-4可能參與MSCs的葡萄糖轉運,Akt基因提高MSCs耐缺氧能力可能與提高GLUT-4的錶達和易位有關.
목적 탐토포도당전운재체(GLUT)-4시부삼여골수간충질간세포(MSCs)적포도당전운이급Akt기인전염제고MSCs내결양능력시부여GLUT-4역위화표체유관.방법 장경Akt기인전염화미전염적MSCs균행상양(5% CO2)화결양(94% N2、1%O2화5%CO2)37 ℃부육8 h.방사동위소법검측천표-탈양포도당(3 H-G)적섭취량,면역세포화학염색、Western blot화RT-PCR분별검측GLUT-4적단백질화mRNA표체.결과 ①결양전염조적3 H-G섭취량시결양비전염조적(1.39±0.13)배(P＜0.05),단잉저우상양비전염조(P＜0.05).②MSCs재상양혹결양、Akt기인전염혹무전염적조건하균가표체GLUT-4단백.여상양비전염조비교,결양비전염조GLUT-4 mRNA화단백적표체수평명현강저(P＜0.05).③여결양비전염조비교,결양전염조적GLUT-4 mRNA[(1.756±0.152)배]화단백[세포총GLUT-4단백(1.653±0.312)배,세포막GLUT-4단백(2.041±0.258)배]적표체수평명현제고(P＜0.05),차GLUT-4단백역위명현;단여상양비전염조비교,기GLUT-4 mRNA화단백적표체수평잉교저(P＜0.05).④MSCs적3 H-G섭취량여세포막중GLUT-4단백적표체정정상관(r=0.415,P=0.001).결론 GLUT-4가능삼여MSCs적포도당전운,Akt기인제고MSCs내결양능력가능여제고GLUT-4적표체화역위유관.
