四川农业大学学报
四川農業大學學報
사천농업대학학보
JOURNAL OF SICHUAN AGRICULTURAL UNIVERSITY
2010年
2期
215-218
,共4页
刘海峰%阎振鑫%董涵%李学伟
劉海峰%閻振鑫%董涵%李學偉
류해봉%염진흠%동함%리학위
前脂肪细胞%定量PCR%脂肪酸生物合成%脂肪酸β-氧化%猪
前脂肪細胞%定量PCR%脂肪痠生物閤成%脂肪痠β-氧化%豬
전지방세포%정량PCR%지방산생물합성%지방산β-양화%저
采用胶原酶消化法分离猪皮下前脂肪细胞,以含50 nmol/L胰岛素、100 nmol/L地塞米松、0.25 mmol/L 3异丁基-1-甲基黄嘌呤、100 nmol/L罗格列酮的分化培养液对前脂肪细胞进行诱导分化,借助实时定量RT-PCR方法检测了PRARγ、DECR1和ECHS1 3基因的表达模式,结果发现:PPARγ、DECR1和ECHS1 3基因均于诱导分化后48 h达到表达高峰,此时的表达量分别是诱导前的93.0,5.4和7.8倍;PPARγ同DECR1和ECHS1两基因表达量变化趋势间的相关系数分别为0.92和0.97,DECR1同ECHS1的相关系数为0.94,均达到极显著相关(P<0.01).实验结果表明:前脂肪细胞在分化过程中细胞内脂肪酸生物合成和脂肪酸β-氧化同时发生,以维持细胞的稳态.
採用膠原酶消化法分離豬皮下前脂肪細胞,以含50 nmol/L胰島素、100 nmol/L地塞米鬆、0.25 mmol/L 3異丁基-1-甲基黃嘌呤、100 nmol/L囉格列酮的分化培養液對前脂肪細胞進行誘導分化,藉助實時定量RT-PCR方法檢測瞭PRARγ、DECR1和ECHS1 3基因的錶達模式,結果髮現:PPARγ、DECR1和ECHS1 3基因均于誘導分化後48 h達到錶達高峰,此時的錶達量分彆是誘導前的93.0,5.4和7.8倍;PPARγ同DECR1和ECHS1兩基因錶達量變化趨勢間的相關繫數分彆為0.92和0.97,DECR1同ECHS1的相關繫數為0.94,均達到極顯著相關(P<0.01).實驗結果錶明:前脂肪細胞在分化過程中細胞內脂肪痠生物閤成和脂肪痠β-氧化同時髮生,以維持細胞的穩態.
채용효원매소화법분리저피하전지방세포,이함50 nmol/L이도소、100 nmol/L지새미송、0.25 mmol/L 3이정기-1-갑기황표령、100 nmol/L라격렬동적분화배양액대전지방세포진행유도분화,차조실시정량RT-PCR방법검측료PRARγ、DECR1화ECHS1 3기인적표체모식,결과발현:PPARγ、DECR1화ECHS1 3기인균우유도분화후48 h체도표체고봉,차시적표체량분별시유도전적93.0,5.4화7.8배;PPARγ동DECR1화ECHS1량기인표체량변화추세간적상관계수분별위0.92화0.97,DECR1동ECHS1적상관계수위0.94,균체도겁현저상관(P<0.01).실험결과표명:전지방세포재분화과정중세포내지방산생물합성화지방산β-양화동시발생,이유지세포적은태.