中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2011年
4期
289-292
,共4页
倪宏波%王冰%姜海芳%周玉龙%王春仁%宫大庆%钱爱东
倪宏波%王冰%薑海芳%週玉龍%王春仁%宮大慶%錢愛東
예굉파%왕빙%강해방%주옥룡%왕춘인%궁대경%전애동
牛边缘无浆体%竞争抑制ELISA%重组MSP5蛋白%流行病学调查
牛邊緣無漿體%競爭抑製ELISA%重組MSP5蛋白%流行病學調查
우변연무장체%경쟁억제ELISA%중조MSP5단백%류행병학조사
为建立检测牛边缘无浆体(Anaplasma marginale)抗体的方法,本研究以牛A.marginale膜表面重组MSP5蛋白作为包被抗原,抗MSP5单克隆抗体(MAb)作为竞争抗体,建立一种用于检测牛A marginale抗体的重组MSP5蛋白竞争抑制ELISA(CI-ELISA)方法.经优化确定CI-ELISA的最佳反应条件为:抗原包被浓度为2μg/孔,封闭液为2%脱脂乳,MAb的稀释度为1:400,酶标二抗的稀释度为1:1000,阴性和阳性血清临界值分别为33%和40%;该方法具有良好的特异性和重复性;2 348份临床血清样品的检测结果表明,217份为阳性,阳性率为9.2%,与IDEXXA marginale抗体检测试剂盒的阳性符合率为95.3%,阴性符合率为100%.本实验建立的ELISA方法具有较高的特异性和重复性,可用于流行病学调查研究.
為建立檢測牛邊緣無漿體(Anaplasma marginale)抗體的方法,本研究以牛A.marginale膜錶麵重組MSP5蛋白作為包被抗原,抗MSP5單剋隆抗體(MAb)作為競爭抗體,建立一種用于檢測牛A marginale抗體的重組MSP5蛋白競爭抑製ELISA(CI-ELISA)方法.經優化確定CI-ELISA的最佳反應條件為:抗原包被濃度為2μg/孔,封閉液為2%脫脂乳,MAb的稀釋度為1:400,酶標二抗的稀釋度為1:1000,陰性和暘性血清臨界值分彆為33%和40%;該方法具有良好的特異性和重複性;2 348份臨床血清樣品的檢測結果錶明,217份為暘性,暘性率為9.2%,與IDEXXA marginale抗體檢測試劑盒的暘性符閤率為95.3%,陰性符閤率為100%.本實驗建立的ELISA方法具有較高的特異性和重複性,可用于流行病學調查研究.
위건립검측우변연무장체(Anaplasma marginale)항체적방법,본연구이우A.marginale막표면중조MSP5단백작위포피항원,항MSP5단극륭항체(MAb)작위경쟁항체,건립일충용우검측우A marginale항체적중조MSP5단백경쟁억제ELISA(CI-ELISA)방법.경우화학정CI-ELISA적최가반응조건위:항원포피농도위2μg/공,봉폐액위2%탈지유,MAb적희석도위1:400,매표이항적희석도위1:1000,음성화양성혈청림계치분별위33%화40%;해방법구유량호적특이성화중복성;2 348빈림상혈청양품적검측결과표명,217빈위양성,양성솔위9.2%,여IDEXXA marginale항체검측시제합적양성부합솔위95.3%,음성부합솔위100%.본실험건립적ELISA방법구유교고적특이성화중복성,가용우류행병학조사연구.
