基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2012年
6期
634-638
,共5页
马玉成%朱涛%姜玉新%李朝品
馬玉成%硃濤%薑玉新%李朝品
마옥성%주도%강옥신%리조품
变应原%嵌合基因%DNA改组
變應原%嵌閤基因%DNA改組
변응원%감합기인%DNA개조
目的 构建尘螨Ⅱ类变应原Der f2和Der p2嵌合基因文库,并进行生物信息学分析.方法 用PCR分别扩增Der f2和Der p2,扩增产物等量混合后用DNaseI酶解；回收50 ～ 100 bp的片段,连续3轮无引物PCR,以Der f2基因的特异性引物进行有引物PCR,扩增片段连接于pUCm-T载体并转化E.coliDH-5α,随机挑取60个单菌落测序,应用生物信息学进行序列比对分析和抗原表位预测(包括T和B细胞抗原表位).结果 获得的10个重组子其编码蛋白不仅呈现新的Th细胞表位,也减少了B细胞表位.结论 成功获得Der f2和Der p2嵌合基因文库,为后期筛选和制备高免疫原性和低变应原性的高效尘螨哮喘疫苗奠定了基础.
目的 構建塵螨Ⅱ類變應原Der f2和Der p2嵌閤基因文庫,併進行生物信息學分析.方法 用PCR分彆擴增Der f2和Der p2,擴增產物等量混閤後用DNaseI酶解；迴收50 ～ 100 bp的片段,連續3輪無引物PCR,以Der f2基因的特異性引物進行有引物PCR,擴增片段連接于pUCm-T載體併轉化E.coliDH-5α,隨機挑取60箇單菌落測序,應用生物信息學進行序列比對分析和抗原錶位預測(包括T和B細胞抗原錶位).結果 穫得的10箇重組子其編碼蛋白不僅呈現新的Th細胞錶位,也減少瞭B細胞錶位.結論 成功穫得Der f2和Der p2嵌閤基因文庫,為後期篩選和製備高免疫原性和低變應原性的高效塵螨哮喘疫苗奠定瞭基礎.
목적 구건진만Ⅱ류변응원Der f2화Der p2감합기인문고,병진행생물신식학분석.방법 용PCR분별확증Der f2화Der p2,확증산물등량혼합후용DNaseI매해；회수50 ～ 100 bp적편단,련속3륜무인물PCR,이Der f2기인적특이성인물진행유인물PCR,확증편단련접우pUCm-T재체병전화E.coliDH-5α,수궤도취60개단균락측서,응용생물신식학진행서렬비대분석화항원표위예측(포괄T화B세포항원표위).결과 획득적10개중조자기편마단백불부정현신적Th세포표위,야감소료B세포표위.결론 성공획득Der f2화Der p2감합기인문고,위후기사선화제비고면역원성화저변응원성적고효진만효천역묘전정료기출.
