中国兽医学报
中國獸醫學報
중국수의학보
CHINESE JOURNAL OF VETERINARY SCIENCE
2005年
2期
141-144
,共4页
梁成珠%杨松%高宏伟%朱来华%蔡梅红%王谦滨%陈溥言
樑成珠%楊鬆%高宏偉%硃來華%蔡梅紅%王謙濱%陳溥言
량성주%양송%고굉위%주래화%채매홍%왕겸빈%진부언
马动脉炎病毒%实时RT-PCR%TaqMan探针%定量检测
馬動脈炎病毒%實時RT-PCR%TaqMan探針%定量檢測
마동맥염병독%실시RT-PCR%TaqMan탐침%정량검측
选取马动脉炎病毒(EAV)基因组中高度保守的开放阅读框7(ORF7)序列,设计了特异性引物和TaqMan探针,利用一步法的实时定量RT-PCR来定量检测EAV.使用含有选定检测序列的克隆标准品做标准曲线,证明该方法可以检测出含有5(4.77)个RNA分子,即可从组织培养液(TCF)中检出一般含有5 PFU/μL病毒拷贝.对猪生殖呼吸道综合征病毒、马疱疹病毒无交叉反应,特异性好.用疫苗用种毒(Bucyrus标准株)肌肉注射于马驹后,定量RT-PCR比病毒分离试验更能灵敏地检出呼吸道排出的病毒.对456份临床鼻腔分泌物样品检测,定量RT-PCR检出6份阳性,而病毒分离只检出2份阳性.一步法实时定量RT-PCR检测样品中的EAV,在快捷、准确、方便和高通量方面优于细胞培养病毒分离的检测方法,可以作为检测马病毒性动脉炎(EVA)病毒的快速方法.
選取馬動脈炎病毒(EAV)基因組中高度保守的開放閱讀框7(ORF7)序列,設計瞭特異性引物和TaqMan探針,利用一步法的實時定量RT-PCR來定量檢測EAV.使用含有選定檢測序列的剋隆標準品做標準麯線,證明該方法可以檢測齣含有5(4.77)箇RNA分子,即可從組織培養液(TCF)中檢齣一般含有5 PFU/μL病毒拷貝.對豬生殖呼吸道綜閤徵病毒、馬皰疹病毒無交扠反應,特異性好.用疫苗用種毒(Bucyrus標準株)肌肉註射于馬駒後,定量RT-PCR比病毒分離試驗更能靈敏地檢齣呼吸道排齣的病毒.對456份臨床鼻腔分泌物樣品檢測,定量RT-PCR檢齣6份暘性,而病毒分離隻檢齣2份暘性.一步法實時定量RT-PCR檢測樣品中的EAV,在快捷、準確、方便和高通量方麵優于細胞培養病毒分離的檢測方法,可以作為檢測馬病毒性動脈炎(EVA)病毒的快速方法.
선취마동맥염병독(EAV)기인조중고도보수적개방열독광7(ORF7)서렬,설계료특이성인물화TaqMan탐침,이용일보법적실시정량RT-PCR래정량검측EAV.사용함유선정검측서렬적극륭표준품주표준곡선,증명해방법가이검측출함유5(4.77)개RNA분자,즉가종조직배양액(TCF)중검출일반함유5 PFU/μL병독고패.대저생식호흡도종합정병독、마포진병독무교차반응,특이성호.용역묘용충독(Bucyrus표준주)기육주사우마구후,정량RT-PCR비병독분리시험경능령민지검출호흡도배출적병독.대456빈림상비강분비물양품검측,정량RT-PCR검출6빈양성,이병독분리지검출2빈양성.일보법실시정량RT-PCR검측양품중적EAV,재쾌첩、준학、방편화고통량방면우우세포배양병독분리적검측방법,가이작위검측마병독성동맥염(EVA)병독적쾌속방법.
