西北农林科技大学学报（自然科学版）
西北農林科技大學學報（自然科學版）
서북농림과기대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF NORTHWEST SCI-TECH UNIVERSITY OF AGRICULTURE AND FORESTRY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2008年
1期
1-6
,共6页
杨柳%于三科%冯新港%苑纯%沈阳%刘金明%林矫矫%蔡幼民
楊柳%于三科%馮新港%苑純%瀋暘%劉金明%林矯矯%蔡幼民
양류%우삼과%풍신항%원순%침양%류금명%림교교%채유민
日本血吸虫%新基因Sj314C10%表达纯化%功能分析
日本血吸蟲%新基因Sj314C10%錶達純化%功能分析
일본혈흡충%신기인Sj314C10%표체순화%공능분석
[目的]筛选新的高效抗日本血吸虫病疫苗.[方法]运用"电子cDNA文库"筛选法和快速cDNA末端扩增技术,对日本血吸虫新基因Sj314C10进行了克隆,构建了原核表达载体pET-28a(+)-Sj314C10,并探索了各种条件对表达蛋白的影响;用生物学软件初步预测了该基因的编码蛋白,用亲和层析法对表达产物进行纯化并完成了表达产物的抗原性检测及其对动物的保护性研究.[结果]表达产物约50 ku,为包涵体蛋白,温度、IPTG浓度和表达时相的改变对该包涵体蛋白的可溶性表达无显著影响;生物信息学分析表明,SJ314C10编码蛋白与杆状病毒凋亡抑制蛋白的重复结构域有78%的同源性,纯化蛋白抗原性良好;小鼠抗血吸虫尾蚴攻击试验显示,与佐剂对照组相比,蛋白免疫组获得了部分保护作用,这为血吸虫候选分子疫苗的研究增添了新内容.[结论]日本血吸虫Sj314C10基因得到了成功表达,所表达蛋白具有良好的抗原性,对小鼠具有一定的免疫保护作用.
[目的]篩選新的高效抗日本血吸蟲病疫苗.[方法]運用"電子cDNA文庫"篩選法和快速cDNA末耑擴增技術,對日本血吸蟲新基因Sj314C10進行瞭剋隆,構建瞭原覈錶達載體pET-28a(+)-Sj314C10,併探索瞭各種條件對錶達蛋白的影響;用生物學軟件初步預測瞭該基因的編碼蛋白,用親和層析法對錶達產物進行純化併完成瞭錶達產物的抗原性檢測及其對動物的保護性研究.[結果]錶達產物約50 ku,為包涵體蛋白,溫度、IPTG濃度和錶達時相的改變對該包涵體蛋白的可溶性錶達無顯著影響;生物信息學分析錶明,SJ314C10編碼蛋白與桿狀病毒凋亡抑製蛋白的重複結構域有78%的同源性,純化蛋白抗原性良好;小鼠抗血吸蟲尾蚴攻擊試驗顯示,與佐劑對照組相比,蛋白免疫組穫得瞭部分保護作用,這為血吸蟲候選分子疫苗的研究增添瞭新內容.[結論]日本血吸蟲Sj314C10基因得到瞭成功錶達,所錶達蛋白具有良好的抗原性,對小鼠具有一定的免疫保護作用.
[목적]사선신적고효항일본혈흡충병역묘.[방법]운용"전자cDNA문고"사선법화쾌속cDNA말단확증기술,대일본혈흡충신기인Sj314C10진행료극륭,구건료원핵표체재체pET-28a(+)-Sj314C10,병탐색료각충조건대표체단백적영향;용생물학연건초보예측료해기인적편마단백,용친화층석법대표체산물진행순화병완성료표체산물적항원성검측급기대동물적보호성연구.[결과]표체산물약50 ku,위포함체단백,온도、IPTG농도화표체시상적개변대해포함체단백적가용성표체무현저영향;생물신식학분석표명,SJ314C10편마단백여간상병독조망억제단백적중복결구역유78%적동원성,순화단백항원성량호;소서항혈흡충미유공격시험현시,여좌제대조조상비,단백면역조획득료부분보호작용,저위혈흡충후선분자역묘적연구증첨료신내용.[결론]일본혈흡충Sj314C10기인득도료성공표체,소표체단백구유량호적항원성,대소서구유일정적면역보호작용.
