CAJ | 학술논문

目的:利用甲型流感病毒丸/Johannesburg/33/94(H3N2)核壳蛋白(NP)全长肽库筛选BALB/c(H-2d)小鼠中NP 酶联免疫斑点法(ELLSPOT)表位,研究其和细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表位的一致性关系,为使用ELISPOT评价流感病毒NP疫苗的细胞免疫效果提供实验依据.方法:以甲型流感病毒A/PR/8/34(HINI)(PR8)感染BALB/c(H-2d)小鼠后,通过检测T细胞分泌γ-干扰素(IFN-γ)的EUSPOT法和体内CTL法检测NP所诱发的细胞免疫反应,综合分析ELISPOT和CTL表位肽之间的关系.结果:Pep36(NP第141～155位氨基酸残基,SNLNDTTYQRTRALV)和Pep37(NP第145～159位氨基酸残基,DITYQRTRALVRTGM)可以诱发较强的ELISPOT反应,根据Pep36和Pep37共有序列合成的Pep147-155(NP第147～155位氨基酸残基,TYQRTRALV)可以诱发与这2条多肽相同强度的ELISPOT反应,表明Pep147-155为NP诱发ELISPOT反应的最强表位,体内CTL也表明它是最强的CTL表位;Pep95(NP第377～391位氨基酸残基,STLELRSRYWAIRTR)、Pep96(NP第381～395位氨基酸残基,LRSRYWAIRTRSGGN)和其他表位肽诱发的ELISPOT反应较弱,体内CTL反应也较弱.结论:BALB/c(H-2d)小鼠中,甲型流感病毒NP诱发ELISPOT反应和CTL反应的表位肽高度相关;实验结果为使用ELISPOT评价流感病毒NP疫苗的细胞免疫效果提供了实验依据.
목적:이용갑형류감병독환/Johannesburg/33/94(H3N2)핵각단백(NP)전장태고사선BALB/c(H-2d)소서중NP 매련면역반점법(ELLSPOT)표위,연구기화세포독성T림파세포(CTL)표위적일치성관계,위사용ELISPOT평개류감병독NP역묘적세포면역효과제공실험의거.방법:이갑형류감병독A/PR/8/34(HINI)(PR8)감염BALB/c(H-2d)소서후,통과검측T세포분비γ-간우소(IFN-γ)적EUSPOT법화체내CTL법검측NP소유발적세포면역반응,종합분석ELISPOT화CTL표위태지간적관계.결과:Pep36(NP제141～155위안기산잔기,SNLNDTTYQRTRALV)화Pep37(NP제145～159위안기산잔기,DITYQRTRALVRTGM)가이유발교강적ELISPOT반응,근거Pep36화Pep37공유서렬합성적Pep147-155(NP제147～155위안기산잔기,TYQRTRALV)가이유발여저2조다태상동강도적ELISPOT반응,표명Pep147-155위NP유발ELISPOT반응적최강표위,체내CTL야표명타시최강적CTL표위;Pep95(NP제377～391위안기산잔기,STLELRSRYWAIRTR)、Pep96(NP제381～395위안기산잔기,LRSRYWAIRTRSGGN)화기타표위태유발적ELISPOT반응교약,체내CTL반응야교약.결론:BALB/c(H-2d)소서중,갑형류감병독NP유발ELISPOT반응화CTL반응적표위태고도상관;실험결과위사용ELISPOT평개류감병독NP역묘적세포면역효과제공료실험의거.