化工学报
化工學報
화공학보
JOURNAL OF CHEMICAL INDUSY AND ENGINEERING (CHINA)
2008年
6期
1479-1484
,共6页
黄星%刘铭%龚博%曾行%张颂怡%曹竹安
黃星%劉銘%龔博%曾行%張頌怡%曹竹安
황성%류명%공박%증행%장송이%조죽안
谷氨酰胺%酶催化%谷氨酰胺合成酶%腺苷酰化位点
穀氨酰胺%酶催化%穀氨酰胺閤成酶%腺苷酰化位點
곡안선알%매최화%곡안선알합성매%선감선화위점
针对酶法生产谷氨酰胺中高浓度铵盐条件下的谷氨酰胺合成酶(GS)腺苷酰化问题,从谷氨酸棒杆菌Corynebacterium glutamicum ATCC 14067调取编码GS的基因glnA,将GS的腺苷酰化位点Tyr405定点突变为Phe405,并在大肠杆菌中表达突变后的GS,优化产酶条件.用突变的GS在摇瓶中进行酶催化过程,通过补加酶催化底物谷氨酸钠和氯化铵,可以提高定点突变的GS生产谷氨酰胺的能力,谷氨酰胺产量达到16.8 g·L-1;在5 L反应器规模的酶催化生产谷氨酰胺过程中,通过调控底物补加方案和反应条件,谷氨酰胺的产量达到34.2 g·L-1,谷氨酰胺对谷氨酸的摩尔转化率为96.3%.
針對酶法生產穀氨酰胺中高濃度銨鹽條件下的穀氨酰胺閤成酶(GS)腺苷酰化問題,從穀氨痠棒桿菌Corynebacterium glutamicum ATCC 14067調取編碼GS的基因glnA,將GS的腺苷酰化位點Tyr405定點突變為Phe405,併在大腸桿菌中錶達突變後的GS,優化產酶條件.用突變的GS在搖瓶中進行酶催化過程,通過補加酶催化底物穀氨痠鈉和氯化銨,可以提高定點突變的GS生產穀氨酰胺的能力,穀氨酰胺產量達到16.8 g·L-1;在5 L反應器規模的酶催化生產穀氨酰胺過程中,通過調控底物補加方案和反應條件,穀氨酰胺的產量達到34.2 g·L-1,穀氨酰胺對穀氨痠的摩爾轉化率為96.3%.
침대매법생산곡안선알중고농도안염조건하적곡안선알합성매(GS)선감선화문제,종곡안산봉간균Corynebacterium glutamicum ATCC 14067조취편마GS적기인glnA,장GS적선감선화위점Tyr405정점돌변위Phe405,병재대장간균중표체돌변후적GS,우화산매조건.용돌변적GS재요병중진행매최화과정,통과보가매최화저물곡안산납화록화안,가이제고정점돌변적GS생산곡안선알적능력,곡안선알산량체도16.8 g·L-1;재5 L반응기규모적매최화생산곡안선알과정중,통과조공저물보가방안화반응조건,곡안선알적산량체도34.2 g·L-1,곡안선알대곡안산적마이전화솔위96.3%.