基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2009年
3期
268-272
,共5页
王毓%刘培淑%张小磊%代彩凤%王岸聪%李娟
王毓%劉培淑%張小磊%代綵鳳%王岸聰%李娟
왕육%류배숙%장소뢰%대채봉%왕안총%리연
RNA干扰%双链RNA%基因%FLIP%TRAIL%卵巢肿瘤
RNA榦擾%雙鏈RNA%基因%FLIP%TRAIL%卵巢腫瘤
RNA간우%쌍련RNA%기인%FLIP%TRAIL%란소종류
目的 探讨RNAi靶向沉默FLIP基因对TRAIL诱导卵巢癌细胞凋亡的影响.方法 设计并体外化学合成FLIP序列特异性双链RNA,在脂质体(LipofectamineTM2000)介导下转染人卵巢癌细胞株A2780.采用半定量RT-PCR和Western blot法检测FLIP-siRNAs转染前后A2780细胞FLIP mRNA和蛋白表达的变化,并筛选出抑制作用最强的FLIP-siRNA.四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测FLIP-siRNA转染前后TRAIL对A2780细胞生长抑制作用的变化.以Annexin-V-PI双染法流式细胞术(FCM)比较FLIP-siRNA转染前后TRAIL诱导的细胞凋亡的情况.结果 特异性FLIP-siRNA片段能有效降低A2780细胞中FLIP mRNA和蛋白水平(P<0.01),并具有时间依赖性;转染FLIP-siRNA后,TRAIL对A2780细胞的生长抑制作用明显增强(P<0.05),TRAIL诱导的细胞凋亡也显著增加(P<0.05).结论 靶向FLIP基因的siRNAs可在转录和翻译水平抑制FLIP表达,并可增加细胞对TRAIL的敏感性.
目的 探討RNAi靶嚮沉默FLIP基因對TRAIL誘導卵巢癌細胞凋亡的影響.方法 設計併體外化學閤成FLIP序列特異性雙鏈RNA,在脂質體(LipofectamineTM2000)介導下轉染人卵巢癌細胞株A2780.採用半定量RT-PCR和Western blot法檢測FLIP-siRNAs轉染前後A2780細胞FLIP mRNA和蛋白錶達的變化,併篩選齣抑製作用最彊的FLIP-siRNA.四甲基偶氮唑鹽(MTT)法檢測FLIP-siRNA轉染前後TRAIL對A2780細胞生長抑製作用的變化.以Annexin-V-PI雙染法流式細胞術(FCM)比較FLIP-siRNA轉染前後TRAIL誘導的細胞凋亡的情況.結果 特異性FLIP-siRNA片段能有效降低A2780細胞中FLIP mRNA和蛋白水平(P<0.01),併具有時間依賴性;轉染FLIP-siRNA後,TRAIL對A2780細胞的生長抑製作用明顯增彊(P<0.05),TRAIL誘導的細胞凋亡也顯著增加(P<0.05).結論 靶嚮FLIP基因的siRNAs可在轉錄和翻譯水平抑製FLIP錶達,併可增加細胞對TRAIL的敏感性.
목적 탐토RNAi파향침묵FLIP기인대TRAIL유도란소암세포조망적영향.방법 설계병체외화학합성FLIP서렬특이성쌍련RNA,재지질체(LipofectamineTM2000)개도하전염인란소암세포주A2780.채용반정량RT-PCR화Western blot법검측FLIP-siRNAs전염전후A2780세포FLIP mRNA화단백표체적변화,병사선출억제작용최강적FLIP-siRNA.사갑기우담서염(MTT)법검측FLIP-siRNA전염전후TRAIL대A2780세포생장억제작용적변화.이Annexin-V-PI쌍염법류식세포술(FCM)비교FLIP-siRNA전염전후TRAIL유도적세포조망적정황.결과 특이성FLIP-siRNA편단능유효강저A2780세포중FLIP mRNA화단백수평(P<0.01),병구유시간의뢰성;전염FLIP-siRNA후,TRAIL대A2780세포적생장억제작용명현증강(P<0.05),TRAIL유도적세포조망야현저증가(P<0.05).결론 파향FLIP기인적siRNAs가재전록화번역수평억제FLIP표체,병가증가세포대TRAIL적민감성.
