农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2010年
3期
610-615
,共6页
徐贤坤%熊毅%刘棋%曾宪垠%龙剑明
徐賢坤%熊毅%劉棋%曾憲垠%龍劍明
서현곤%웅의%류기%증헌은%룡검명
γ-干扰素%水牛%单克隆抗体
γ-榦擾素%水牛%單剋隆抗體
γ-간우소%수우%단극륭항체
将原核表达的重组水牛(Bubalus bubalis)γ-干扰素成熟蛋(rGST-WBIFN-γ)以100 μg/只剂量免疫8周龄Balb/c小鼠(Mus musculus),经5次免疫后,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,以rHIS-WB-IFN-γ和rGST-WBIFN-γ蛋白共同作为检测抗原进行间接ELISA检测,筛选并最终得到了2株能稳定分泌抗体的单细胞克隆株(分别命名为IE4和4A11),分泌抗体亚型均为IgG1型,轻链均为κ链.Western-blotting检测显示:2株单克隆抗体与原核表达的rWBIFN-γ蛋白均能特异性结合,具有良好的免疫反应原性.
將原覈錶達的重組水牛(Bubalus bubalis)γ-榦擾素成熟蛋(rGST-WBIFN-γ)以100 μg/隻劑量免疫8週齡Balb/c小鼠(Mus musculus),經5次免疫後,取脾細胞與SP2/0骨髓瘤細胞進行融閤,以rHIS-WB-IFN-γ和rGST-WBIFN-γ蛋白共同作為檢測抗原進行間接ELISA檢測,篩選併最終得到瞭2株能穩定分泌抗體的單細胞剋隆株(分彆命名為IE4和4A11),分泌抗體亞型均為IgG1型,輕鏈均為κ鏈.Western-blotting檢測顯示:2株單剋隆抗體與原覈錶達的rWBIFN-γ蛋白均能特異性結閤,具有良好的免疫反應原性.
장원핵표체적중조수우(Bubalus bubalis)γ-간우소성숙단(rGST-WBIFN-γ)이100 μg/지제량면역8주령Balb/c소서(Mus musculus),경5차면역후,취비세포여SP2/0골수류세포진행융합,이rHIS-WB-IFN-γ화rGST-WBIFN-γ단백공동작위검측항원진행간접ELISA검측,사선병최종득도료2주능은정분비항체적단세포극륭주(분별명명위IE4화4A11),분비항체아형균위IgG1형,경련균위κ련.Western-blotting검측현시:2주단극륭항체여원핵표체적rWBIFN-γ단백균능특이성결합,구유량호적면역반응원성.
