CAJ | 학술논문

目的:与平板培养比较,探讨悬滴三维培养对大鼠骨髓间充质干细胞(rMSCs)肝样分化的诱导效应.方法:对rMSCs进行悬滴培养,以肝细胞生长因子(HGF)作为诱导因子,同时设定平板培养诱导和非诱导对照组,在培养第7、14和21 d后,通过RT-PCR法和免疫荧光技术检测白蛋白(ALB)、甲胎蛋白(APF)和角蛋白(CK-18)在mRNA和蛋白水平上的表达情况,并通过ELISA检测培养液上清中ALB的分泌.结果:HGF悬滴培养的rMSCs形成球状三维结构,内部呈现空囊样结构,大量细胞聚集在球体外侧面;在第7 d就出现ALB和CK-18的强阳性表达,而AFP则表达较弱.HGF培养的单层rMSCs直到第14 d才出现ALB、AFP和CK-18 mRNA的弱阳性表达,蛋白表达则在第21 d才呈现阳性.ELISA检测到HGF悬滴培养后rMSCs能够胞外分泌ALB,与正常和平板培养诱导组比较差异显著(P< 01).结论:悬滴培养为rMSCs创造一种球形三维培养微环境,在HGF的诱导作用下,rMSCs横向分化为肝样细胞.
목적:여평판배양비교,탐토현적삼유배양대대서골수간충질간세포(rMSCs)간양분화적유도효응.방법:대rMSCs진행현적배양,이간세포생장인자(HGF)작위유도인자,동시설정평판배양유도화비유도대조조,재배양제7、14화21 d후,통과RT-PCR법화면역형광기술검측백단백(ALB)、갑태단백(APF)화각단백(CK-18)재mRNA화단백수평상적표체정황,병통과ELISA검측배양액상청중ALB적분비.결과:HGF현적배양적rMSCs형성구상삼유결구,내부정현공낭양결구,대량세포취집재구체외측면;재제7 d취출현ALB화CK-18적강양성표체,이AFP칙표체교약.HGF배양적단층rMSCs직도제14 d재출현ALB、AFP화CK-18 mRNA적약양성표체,단백표체칙재제21 d재정현양성.ELISA검측도HGF현적배양후rMSCs능구포외분비ALB,여정상화평판배양유도조비교차이현저(P< 01).결론:현적배양위rMSCs창조일충구형삼유배양미배경,재HGF적유도작용하,rMSCs횡향분화위간양세포.