国际检验医学杂志
國際檢驗醫學雜誌
국제검험의학잡지
INTERNATIONAL JOURNAL OF LABORATORY MEDICINE
2011年
1期
14-15,17
,共3页
谢海花%王志红%柯龙凤%黄粱浒%兰风华
謝海花%王誌紅%柯龍鳳%黃粱滸%蘭風華
사해화%왕지홍%가룡봉%황량호%란풍화
体外研究%突变%核苷酸结合结构域%原核表达载体
體外研究%突變%覈苷痠結閤結構域%原覈錶達載體
체외연구%돌변%핵감산결합결구역%원핵표체재체
目的 构建R617C、P508L和G512S突变型表达载体并对其进行鉴定.方法 以野生型pGEX-4T-2-NBD原核表达载体为模板,通过体外诱导突变构建突变型表达载体,序列分析鉴定R617C、P508L和G512S突变重组子.结果 突变型重组载体测序结果与患者的突变位点完全符合;表达产物的12%SDS-PAGE和蛋白质印迹也显示,约40.5×103的特异性区带能被特异性单克隆抗体所识别,与预期的结果相符;通过GST蛋白纯化试剂盒获得较高纯度的目的 蛋白.结论 3个ALDP突变体的成功构建为进一步研究突变对ALDP结构和功能的影响奠定了基础,为了解X-ALD的分子发病机制创造了条件.
目的 構建R617C、P508L和G512S突變型錶達載體併對其進行鑒定.方法 以野生型pGEX-4T-2-NBD原覈錶達載體為模闆,通過體外誘導突變構建突變型錶達載體,序列分析鑒定R617C、P508L和G512S突變重組子.結果 突變型重組載體測序結果與患者的突變位點完全符閤;錶達產物的12%SDS-PAGE和蛋白質印跡也顯示,約40.5×103的特異性區帶能被特異性單剋隆抗體所識彆,與預期的結果相符;通過GST蛋白純化試劑盒穫得較高純度的目的 蛋白.結論 3箇ALDP突變體的成功構建為進一步研究突變對ALDP結構和功能的影響奠定瞭基礎,為瞭解X-ALD的分子髮病機製創造瞭條件.
목적 구건R617C、P508L화G512S돌변형표체재체병대기진행감정.방법 이야생형pGEX-4T-2-NBD원핵표체재체위모판,통과체외유도돌변구건돌변형표체재체,서렬분석감정R617C、P508L화G512S돌변중조자.결과 돌변형중조재체측서결과여환자적돌변위점완전부합;표체산물적12%SDS-PAGE화단백질인적야현시,약40.5×103적특이성구대능피특이성단극륭항체소식별,여예기적결과상부;통과GST단백순화시제합획득교고순도적목적 단백.결론 3개ALDP돌변체적성공구건위진일보연구돌변대ALDP결구화공능적영향전정료기출,위료해X-ALD적분자발병궤제창조료조건.
