CAJ | 학술논문

本研究探讨内皮细胞特异性缺失PTEN基因能否影响小鼠胚胎AGM区血液血管干细胞(hemangioblast)的发育.基于Cre/loxP系统,获得Tie2 CrePtenloxp/loxp和Tie2 CrePtenloxp/wt基因型小鼠胚胎.采用PCR方法进行基因型鉴定；分离E10-E10.5胚胎AGM区,用胶原酶消化成单细胞,在甲基纤维素半固体体系里进行BL-CFC(blast colony-forming cell)培养,4-5天后计数BL-CFC数目.将单个BL-CFC挑出进行扩增培养,悬浮细胞进行造血集落培养,贴壁细胞在Matrigel上进行体外成血管实验,鉴定其双向分化功能.结果表明:内皮细胞特异性缺失PTEN基因,小鼠胚胎AGM区BL-CFC数量下降；同时,BL-CFC的造血分化能力增强,但BL-CFC来源的内皮细胞体外成血管能力下降.结论:内皮细胞特异性缺失PTEN基因,可以在血液血管干细胞水平影响造血和内皮细胞的分化.
본연구탐토내피세포특이성결실PTEN기인능부영향소서배태AGM구혈액혈관간세포(hemangioblast)적발육.기우Cre/loxP계통,획득Tie2 CrePtenloxp/loxp화Tie2 CrePtenloxp/wt기인형소서배태.채용PCR방법진행기인형감정；분리E10-E10.5배태AGM구,용효원매소화성단세포,재갑기섬유소반고체체계리진행BL-CFC(blast colony-forming cell)배양,4-5천후계수BL-CFC수목.장단개BL-CFC도출진행확증배양,현부세포진행조혈집락배양,첩벽세포재Matrigel상진행체외성혈관실험,감정기쌍향분화공능.결과표명:내피세포특이성결실PTEN기인,소서배태AGM구BL-CFC수량하강；동시,BL-CFC적조혈분화능력증강,단BL-CFC래원적내피세포체외성혈관능력하강.결론:내피세포특이성결실PTEN기인,가이재혈액혈관간세포수평영향조혈화내피세포적분화.