中国组织工程研究与临床康复
中國組織工程研究與臨床康複
중국조직공정연구여림상강복
JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATIVE TISSUE ENGINEERING RESEARCH
2011年
50期
9348-9352
,共5页
郝维平%姚友生%王家伟%邓毕华%吕夷松
郝維平%姚友生%王傢偉%鄧畢華%呂夷鬆
학유평%요우생%왕가위%산필화%려이송
膀胱%上皮细胞%培养基%细胞培养%组织
膀胱%上皮細胞%培養基%細胞培養%組織
방광%상피세포%배양기%세포배양%조직
背景:移行上皮细胞的分离方法有酶消化法、组织块法及刮削法3种.目的:探讨培养人类膀胱移行上皮细胞和其传代的最佳方法.方法:培养人类膀胱移行上皮细胞,观察细胞在MEM-F12和KSFM培养基中的生长增殖以及形态变化.免疫荧光染色观察上皮细胞特异性蛋白标记AE1及仅在尿路上皮组织中特异表达的尿空斑蛋白Uroplakin III,以鉴定膀胱移行上皮细胞.分别利用4步胰蛋白酶消化法和组织块再植法对细胞进行传代培养.结果与结论:①细胞在MEM-F12培养基中较KSFM培养基中爬出及融合均快,生长状态良好.②细胞免疫荧光鉴定证实为移行上皮细胞.③胰蛋白酶消化传代细胞,传代第18~24 h贴壁,贴壁后无法继续生长,60~72 h后细胞开始凋亡;组织块再种传代细胞生长稳定迅速,24~48 h细胞开始爬出,第10~16天达到80%融合,传至第4代后开始出现衰退.说明以DMEM-F12培养基进行组织块培养法和组织块再种法是人类膀胱移行上皮细胞原代培养和传代培养经济有效的方法.
揹景:移行上皮細胞的分離方法有酶消化法、組織塊法及颳削法3種.目的:探討培養人類膀胱移行上皮細胞和其傳代的最佳方法.方法:培養人類膀胱移行上皮細胞,觀察細胞在MEM-F12和KSFM培養基中的生長增殖以及形態變化.免疫熒光染色觀察上皮細胞特異性蛋白標記AE1及僅在尿路上皮組織中特異錶達的尿空斑蛋白Uroplakin III,以鑒定膀胱移行上皮細胞.分彆利用4步胰蛋白酶消化法和組織塊再植法對細胞進行傳代培養.結果與結論:①細胞在MEM-F12培養基中較KSFM培養基中爬齣及融閤均快,生長狀態良好.②細胞免疫熒光鑒定證實為移行上皮細胞.③胰蛋白酶消化傳代細胞,傳代第18~24 h貼壁,貼壁後無法繼續生長,60~72 h後細胞開始凋亡;組織塊再種傳代細胞生長穩定迅速,24~48 h細胞開始爬齣,第10~16天達到80%融閤,傳至第4代後開始齣現衰退.說明以DMEM-F12培養基進行組織塊培養法和組織塊再種法是人類膀胱移行上皮細胞原代培養和傳代培養經濟有效的方法.
배경:이행상피세포적분리방법유매소화법、조직괴법급괄삭법3충.목적:탐토배양인류방광이행상피세포화기전대적최가방법.방법:배양인류방광이행상피세포,관찰세포재MEM-F12화KSFM배양기중적생장증식이급형태변화.면역형광염색관찰상피세포특이성단백표기AE1급부재뇨로상피조직중특이표체적뇨공반단백Uroplakin III,이감정방광이행상피세포.분별이용4보이단백매소화법화조직괴재식법대세포진행전대배양.결과여결론:①세포재MEM-F12배양기중교KSFM배양기중파출급융합균쾌,생장상태량호.②세포면역형광감정증실위이행상피세포.③이단백매소화전대세포,전대제18~24 h첩벽,첩벽후무법계속생장,60~72 h후세포개시조망;조직괴재충전대세포생장은정신속,24~48 h세포개시파출,제10~16천체도80%융합,전지제4대후개시출현쇠퇴.설명이DMEM-F12배양기진행조직괴배양법화조직괴재충법시인류방광이행상피세포원대배양화전대배양경제유효적방법.
