免疫学杂志
免疫學雜誌
면역학잡지
IMMUNOLOGICAL JOURNAL
2002年
3期
183-186
,共4页
解志刚%郭宁%施明%冯健男%孙瑛勋%于鸣%沈倍奋
解誌剛%郭寧%施明%馮健男%孫瑛勛%于鳴%瀋倍奮
해지강%곽저%시명%풍건남%손영훈%우명%침배강
克隆%CD16%抗体
剋隆%CD16%抗體
극륭%CD16%항체
目的克隆抗人CD16单克隆抗体重、轻链可变区(VH,VL)基因并合成单链抗体(ScFv)基因.方法从分泌抗人CD16单克隆抗体的杂交瘤细胞B88-9中提取总RNA,应用RT-PCR技术获得抗CD16单克隆抗体的VH、VL基因.用连接肽(Linker)将VH和VL连接成具有VH-Linker-VL结构的ScFv基因,将其克隆到表达载体pcDNA3.1(+),并转染COS-7细胞.结果VH基因长度为354bp,属于鼠抗体可变区重链基因家族Ⅰ(B)亚群;VL基因长度为333 bp,属于鼠抗体可变区kappa轻链基因家族Ⅲ亚群.采用夹心ELISA方法检测到ScFv的表达.结论抗人CD16单克隆抗体VH与VL基因的克隆和ScFv基因的构建为基于CD16的导向免疫治疗奠定了基础.
目的剋隆抗人CD16單剋隆抗體重、輕鏈可變區(VH,VL)基因併閤成單鏈抗體(ScFv)基因.方法從分泌抗人CD16單剋隆抗體的雜交瘤細胞B88-9中提取總RNA,應用RT-PCR技術穫得抗CD16單剋隆抗體的VH、VL基因.用連接肽(Linker)將VH和VL連接成具有VH-Linker-VL結構的ScFv基因,將其剋隆到錶達載體pcDNA3.1(+),併轉染COS-7細胞.結果VH基因長度為354bp,屬于鼠抗體可變區重鏈基因傢族Ⅰ(B)亞群;VL基因長度為333 bp,屬于鼠抗體可變區kappa輕鏈基因傢族Ⅲ亞群.採用夾心ELISA方法檢測到ScFv的錶達.結論抗人CD16單剋隆抗體VH與VL基因的剋隆和ScFv基因的構建為基于CD16的導嚮免疫治療奠定瞭基礎.
목적극륭항인CD16단극륭항체중、경련가변구(VH,VL)기인병합성단련항체(ScFv)기인.방법종분비항인CD16단극륭항체적잡교류세포B88-9중제취총RNA,응용RT-PCR기술획득항CD16단극륭항체적VH、VL기인.용련접태(Linker)장VH화VL련접성구유VH-Linker-VL결구적ScFv기인,장기극륭도표체재체pcDNA3.1(+),병전염COS-7세포.결과VH기인장도위354bp,속우서항체가변구중련기인가족Ⅰ(B)아군;VL기인장도위333 bp,속우서항체가변구kappa경련기인가족Ⅲ아군.채용협심ELISA방법검측도ScFv적표체.결론항인CD16단극륭항체VH여VL기인적극륭화ScFv기인적구건위기우CD16적도향면역치료전정료기출.
