同济大学学报(医学版)
同濟大學學報(醫學版)
동제대학학보(의학판)
JOURNAL OF TONGJI UNIVERSITY (MEDICAL SCIENCE)
2005年
3期
22-24,32
,共4页
张文萍%谈月娣%张天祥%蒋丽珍
張文萍%談月娣%張天祥%蔣麗珍
장문평%담월제%장천상%장려진
卵巢肿瘤%转基因%FasL%HO-8910细胞系
卵巢腫瘤%轉基因%FasL%HO-8910細胞繫
란소종류%전기인%FasL%HO-8910세포계
目的建立表达转FasL基因卵巢癌细胞系,为以FasL为靶点治疗卵巢癌提供理想细胞模型.方法应用分子克隆技术,将人FasL cDNA片段正向插入逆转录病毒载体pLXSN构建重组质粒pL(hFasL)SN,转染包装细胞PA317收获假病毒上清,磷酸钙法转染卵巢癌HO-8910细胞筛选建系,酶切PCR鉴定、流式细胞仪(FCM)法检测.结果酶切鉴定证实重组质粒pL(hFasL)SN中存在FasL,PCR方法从转染细胞HO-8910-FasL基因组中扩增出0.86 kb片段,FCM检测显示FasL表达增加40.32%,HL-60细胞与HO-8910-FasL细胞共培养HL-60细胞凋亡增加25.65%.结论应用逆转录病毒法建立了稳定高表达FasL并具功能的HO-8910-FasL细胞系.
目的建立錶達轉FasL基因卵巢癌細胞繫,為以FasL為靶點治療卵巢癌提供理想細胞模型.方法應用分子剋隆技術,將人FasL cDNA片段正嚮插入逆轉錄病毒載體pLXSN構建重組質粒pL(hFasL)SN,轉染包裝細胞PA317收穫假病毒上清,燐痠鈣法轉染卵巢癌HO-8910細胞篩選建繫,酶切PCR鑒定、流式細胞儀(FCM)法檢測.結果酶切鑒定證實重組質粒pL(hFasL)SN中存在FasL,PCR方法從轉染細胞HO-8910-FasL基因組中擴增齣0.86 kb片段,FCM檢測顯示FasL錶達增加40.32%,HL-60細胞與HO-8910-FasL細胞共培養HL-60細胞凋亡增加25.65%.結論應用逆轉錄病毒法建立瞭穩定高錶達FasL併具功能的HO-8910-FasL細胞繫.
목적건립표체전FasL기인란소암세포계,위이FasL위파점치료란소암제공이상세포모형.방법응용분자극륭기술,장인FasL cDNA편단정향삽입역전록병독재체pLXSN구건중조질립pL(hFasL)SN,전염포장세포PA317수획가병독상청,린산개법전염란소암HO-8910세포사선건계,매절PCR감정、류식세포의(FCM)법검측.결과매절감정증실중조질립pL(hFasL)SN중존재FasL,PCR방법종전염세포HO-8910-FasL기인조중확증출0.86 kb편단,FCM검측현시FasL표체증가40.32%,HL-60세포여HO-8910-FasL세포공배양HL-60세포조망증가25.65%.결론응용역전록병독법건립료은정고표체FasL병구공능적HO-8910-FasL세포계.