CAJ | 학술논문

目的为了获得乳腺定位表达人蛋白C(hPC)的转基因动物.方法采用分步克隆的方法,构建大鼠乳清酸蛋白(WAP)启动子调控的人蛋白C质粒,命名为pWPC.将该质粒系统鉴定后,用PvuⅠ+SmaⅠ双酶切,回收4.6kb的片段(WAP-hPC-PolyA).通过显微注射技术,将其注入昆明小鼠受精卵雄原核内;共注受精卵810枚,存活640枚,移植给28只假孕母鼠,怀孕的18只母鼠共产仔81只.结果提取鼠尾基因组DNA进行PCR检测,34只阳性,再经Southern blot检测,其中20只整合阳性;将7只整合阳性母鼠传代,产仔7日后收集乳汁,进行ELJSA检测,结果均有表达.结论已成功建立了人蛋白C转基因鼠乳腺生物反应器,为hPC乳腺表达研究奠定了基础.
목적위료획득유선정위표체인단백C(hPC)적전기인동물.방법채용분보극륭적방법,구건대서유청산단백(WAP)계동자조공적인단백C질립,명명위pWPC.장해질립계통감정후,용PvuⅠ+SmaⅠ쌍매절,회수4.6kb적편단(WAP-hPC-PolyA).통과현미주사기술,장기주입곤명소서수정란웅원핵내;공주수정란810매,존활640매,이식급28지가잉모서,부잉적18지모서공산자81지.결과제취서미기인조DNA진행PCR검측,34지양성,재경Southern blot검측,기중20지정합양성;장7지정합양성모서전대,산자7일후수집유즙,진행ELJSA검측,결과균유표체.결론이성공건립료인단백C전기인서유선생물반응기,위hPC유선표체연구전정료기출.