药学服务与研究
藥學服務與研究
약학복무여연구
PHARMACEUTICAL CARE AND RESEARCH
2006年
1期
10-13
,共4页
张阵阵%郭美丽%张军东%陆倍倍
張陣陣%郭美麗%張軍東%陸倍倍
장진진%곽미려%장군동%륙배배
红花%随机扩增多态性DNA%反应体系%构建
紅花%隨機擴增多態性DNA%反應體繫%構建
홍화%수궤확증다태성DNA%반응체계%구건
目的:考察不同因素对红花随机扩增多态性DNA反应体系的影响,建立并优化反应体系.方法:提取红花基因组DNA,分别设计Taq酶浓度(三水平:0.02、0.04、0.06 U/μL)、dNTP浓度(三水平:0.10、0.20、0.30 mmol/L)和引物(primer)浓度(三水平:0.16、0.32、0.48 pmol/L)的三因素实验,进行PCR扩增.根据PCR产物的琼脂糖凝胶电泳图确定最优的Taq酶浓度、dNTP浓度和引物浓度.进一步设计Mg2+浓度(三水平:1.0、1.5、2.0 mmol/L)和模板浓度(四水平:1.00、1.25、1.50、1.75 mg/L)的两因素实验,进行PCR扩增,确定最佳Mg2+浓度和模板浓度.结果:三因素实验中,第17条组合泳道和两因素实验中第6条组合泳道扩增主带稳定、均匀、清晰,条带数目多.结论:确定红花随机扩增多态性DNA反应25μL反应体系中最佳组合为:Taq酶0.04 U/μL、dNTP 0.30 mmol/L、引物0.32 pmol/L、Mg2+L 5 mmol/L、模板浓度1.00 mg/L.
目的:攷察不同因素對紅花隨機擴增多態性DNA反應體繫的影響,建立併優化反應體繫.方法:提取紅花基因組DNA,分彆設計Taq酶濃度(三水平:0.02、0.04、0.06 U/μL)、dNTP濃度(三水平:0.10、0.20、0.30 mmol/L)和引物(primer)濃度(三水平:0.16、0.32、0.48 pmol/L)的三因素實驗,進行PCR擴增.根據PCR產物的瓊脂糖凝膠電泳圖確定最優的Taq酶濃度、dNTP濃度和引物濃度.進一步設計Mg2+濃度(三水平:1.0、1.5、2.0 mmol/L)和模闆濃度(四水平:1.00、1.25、1.50、1.75 mg/L)的兩因素實驗,進行PCR擴增,確定最佳Mg2+濃度和模闆濃度.結果:三因素實驗中,第17條組閤泳道和兩因素實驗中第6條組閤泳道擴增主帶穩定、均勻、清晰,條帶數目多.結論:確定紅花隨機擴增多態性DNA反應25μL反應體繫中最佳組閤為:Taq酶0.04 U/μL、dNTP 0.30 mmol/L、引物0.32 pmol/L、Mg2+L 5 mmol/L、模闆濃度1.00 mg/L.
목적:고찰불동인소대홍화수궤확증다태성DNA반응체계적영향,건립병우화반응체계.방법:제취홍화기인조DNA,분별설계Taq매농도(삼수평:0.02、0.04、0.06 U/μL)、dNTP농도(삼수평:0.10、0.20、0.30 mmol/L)화인물(primer)농도(삼수평:0.16、0.32、0.48 pmol/L)적삼인소실험,진행PCR확증.근거PCR산물적경지당응효전영도학정최우적Taq매농도、dNTP농도화인물농도.진일보설계Mg2+농도(삼수평:1.0、1.5、2.0 mmol/L)화모판농도(사수평:1.00、1.25、1.50、1.75 mg/L)적량인소실험,진행PCR확증,학정최가Mg2+농도화모판농도.결과:삼인소실험중,제17조조합영도화량인소실험중제6조조합영도확증주대은정、균균、청석,조대수목다.결론:학정홍화수궤확증다태성DNA반응25μL반응체계중최가조합위:Taq매0.04 U/μL、dNTP 0.30 mmol/L、인물0.32 pmol/L、Mg2+L 5 mmol/L、모판농도1.00 mg/L.
