吉林大学学报（医学版）
吉林大學學報（醫學版）
길림대학학보（의학판）
JOURNAL OF JILIN UNIVERSITY(MEDICINE EDITION)
2006年
5期
777-780,封2
,共5页
王银萍%王贵民%薛世泉%邹亚斌
王銀萍%王貴民%薛世泉%鄒亞斌
왕은평%왕귀민%설세천%추아빈
MN/CA9基因%逆转录聚合酶链反应%小鼠,近交ICR
MN/CA9基因%逆轉錄聚閤酶鏈反應%小鼠,近交ICR
MN/CA9기인%역전록취합매련반응%소서,근교ICR
目的:克隆、分析ICR小鼠MN/CA9基因序列,并检测MN/CA9基因在ICR小鼠各组织中的表达.方法:分别取ICR小鼠小肠、肝、肾、脾、胃、胸腺、心脏、卵巢、肺、胰腺、肌肉、皮肤、子宫和膀胱新鲜组织,采用胍尼啶异硫氢酸呱酚氯仿提取法(GIT)提取总RNA.合成cDNA的第1链和第2链,连接EcoRⅠ载体,EcoRⅠ末端磷酸化,XhoⅠ消化,将cDNA构建到ZAP express vector进行包装、种植培养,筛选、切取噬菌体,使用引物扩增后进行DNA序列分析.用逆转录聚合酶链反应检测小鼠MN/CA9基因在上述组织中的表达.结果:使用人类MN/CA9基因片段做探针,用放射性同位素32P标记探针,筛选1.47×103大肠埃希菌落,杂交后发现一阳性cDNA信号,序列测定确定其含1 671 bp核苷酸序列(已在GenBank登录,登录号AB086322),这个序列与人类的MN/CA9(基因序列号Z54349)有69.1%的同源性.在引物P521-P1193区间,MN/CA9基因在小鼠小肠、子宫、肌肉、胰腺、心脏、肺、胸腺、脾、肾、卵巢、胃和膀胱组织表达均较强,在皮肤和肝脏不表达.结论:MN/CA9基因在ICR小鼠组织中的表达与人类基本相同,可以用ICR小鼠进行MN/CA9基因的研究.
目的:剋隆、分析ICR小鼠MN/CA9基因序列,併檢測MN/CA9基因在ICR小鼠各組織中的錶達.方法:分彆取ICR小鼠小腸、肝、腎、脾、胃、胸腺、心髒、卵巢、肺、胰腺、肌肉、皮膚、子宮和膀胱新鮮組織,採用胍尼啶異硫氫痠呱酚氯倣提取法(GIT)提取總RNA.閤成cDNA的第1鏈和第2鏈,連接EcoRⅠ載體,EcoRⅠ末耑燐痠化,XhoⅠ消化,將cDNA構建到ZAP express vector進行包裝、種植培養,篩選、切取噬菌體,使用引物擴增後進行DNA序列分析.用逆轉錄聚閤酶鏈反應檢測小鼠MN/CA9基因在上述組織中的錶達.結果:使用人類MN/CA9基因片段做探針,用放射性同位素32P標記探針,篩選1.47×103大腸埃希菌落,雜交後髮現一暘性cDNA信號,序列測定確定其含1 671 bp覈苷痠序列(已在GenBank登錄,登錄號AB086322),這箇序列與人類的MN/CA9(基因序列號Z54349)有69.1%的同源性.在引物P521-P1193區間,MN/CA9基因在小鼠小腸、子宮、肌肉、胰腺、心髒、肺、胸腺、脾、腎、卵巢、胃和膀胱組織錶達均較彊,在皮膚和肝髒不錶達.結論:MN/CA9基因在ICR小鼠組織中的錶達與人類基本相同,可以用ICR小鼠進行MN/CA9基因的研究.
목적:극륭、분석ICR소서MN/CA9기인서렬,병검측MN/CA9기인재ICR소서각조직중적표체.방법:분별취ICR소서소장、간、신、비、위、흉선、심장、란소、폐、이선、기육、피부、자궁화방광신선조직,채용고니정이류경산고분록방제취법(GIT)제취총RNA.합성cDNA적제1련화제2련,련접EcoRⅠ재체,EcoRⅠ말단린산화,XhoⅠ소화,장cDNA구건도ZAP express vector진행포장、충식배양,사선、절취서균체,사용인물확증후진행DNA서렬분석.용역전록취합매련반응검측소서MN/CA9기인재상술조직중적표체.결과:사용인류MN/CA9기인편단주탐침,용방사성동위소32P표기탐침,사선1.47×103대장애희균락,잡교후발현일양성cDNA신호,서렬측정학정기함1 671 bp핵감산서렬(이재GenBank등록,등록호AB086322),저개서렬여인류적MN/CA9(기인서렬호Z54349)유69.1%적동원성.재인물P521-P1193구간,MN/CA9기인재소서소장、자궁、기육、이선、심장、폐、흉선、비、신、란소、위화방광조직표체균교강,재피부화간장불표체.결론:MN/CA9기인재ICR소서조직중적표체여인류기본상동,가이용ICR소서진행MN/CA9기인적연구.
