CAJ | 학술논문

目的:将已构建的重组腺病毒Ad-VEGF165进行扩增和纯化并观察其对人胃腺癌细胞(BGC-823)在体外生长及其受体表达的影响.方法:以人胚肾293细胞对重组腺病毒Ad-VEGF165和对照病毒Ad-GFP进行包装、扩增后感染BGC-823N胞,应用MTT比色法分析VEGF165对该种细胞体外生长的影响,并以免疫细胞化学方法检测该种细胞VEGFR-2的表达情况.结果:成功扩增及纯化了重组腺病毒Ad-VEGF165及对照病毒Ad-GFP,获得约3.2×1013pfu/L滴度的重组腺病毒和2.0×1013 pfu/L滴度的对照病毒.当感染复数(MOI)为20时转导率即接近100%而无明显细胞中毒现象.MTT结果显示Ad-VEGF165组吸光度明显高于Ad-GFP组(24 h:0.960±0.0 1 vs 0.737±O.01,P＜0.01:48 h:1.321±0.03 vs0.981±0.02,P＜0.01:72 h:1.663±0.03 vs 1.207±0.01,P＜0.01)及对照组(24 h:0.960±0.01 vs 0.724±0.03.P＜0.01:48 h:1.321±0.03 vs 0.968±0.01.P＜0.01:72 h:1.663±0.03 vs 1.185±0.02,P＜0.01).另外,在该细胞株上检测到了VEGFR-2的表达,且在Ad-VEGF165组其表达明显高于Ad-GFP组(62.5%vs37.6%,P＜0.01)和对照组(62.5%vs 34.1%,P＜0.01).结论:VEGF对胃癌细胞有直接的促生长作用,并可上调其主要受体VEGFR-2的表达水平,从而进一步证实了VEGF对胃癌细胞的自分泌作用.
목적:장이구건적중조선병독Ad-VEGF165진행확증화순화병관찰기대인위선암세포(BGC-823)재체외생장급기수체표체적영향.방법:이인배신293세포대중조선병독Ad-VEGF165화대조병독Ad-GFP진행포장、확증후감염BGC-823N포,응용MTT비색법분석VEGF165대해충세포체외생장적영향,병이면역세포화학방법검측해충세포VEGFR-2적표체정황.결과:성공확증급순화료중조선병독Ad-VEGF165급대조병독Ad-GFP,획득약3.2×1013pfu/L적도적중조선병독화2.0×1013 pfu/L적도적대조병독.당감염복수(MOI)위20시전도솔즉접근100%이무명현세포중독현상.MTT결과현시Ad-VEGF165조흡광도명현고우Ad-GFP조(24 h:0.960±0.0 1 vs 0.737±O.01,P＜0.01:48 h:1.321±0.03 vs0.981±0.02,P＜0.01:72 h:1.663±0.03 vs 1.207±0.01,P＜0.01)급대조조(24 h:0.960±0.01 vs 0.724±0.03.P＜0.01:48 h:1.321±0.03 vs 0.968±0.01.P＜0.01:72 h:1.663±0.03 vs 1.185±0.02,P＜0.01).령외,재해세포주상검측도료VEGFR-2적표체,차재Ad-VEGF165조기표체명현고우Ad-GFP조(62.5%vs37.6%,P＜0.01)화대조조(62.5%vs 34.1%,P＜0.01).결론:VEGF대위암세포유직접적촉생장작용,병가상조기주요수체VEGFR-2적표체수평,종이진일보증실료VEGF대위암세포적자분비작용.