中国农学通报
中國農學通報
중국농학통보
CHINESE AGRICULTURAL SCIENCE BULLETIN
2007年
6期
23-27
,共5页
庄淑珍%郭继娜%郑耀虎%李菁菁%张富春
莊淑珍%郭繼娜%鄭耀虎%李菁菁%張富春
장숙진%곽계나%정요호%리정정%장부춘
草原兔尾鼠%RNA干扰载体%卵透明带3%尾静脉大容量快速注射
草原兔尾鼠%RNA榦擾載體%卵透明帶3%尾靜脈大容量快速註射
초원토미서%RNA간우재체%란투명대3%미정맥대용량쾌속주사
[目的]为探索新疆草原兔尾鼠(Lagurus lagurus)卵透明带3(lZP3)在精卵结合中的机理,有效的控制草原兔尾鼠的生育;[方法]将RNA干扰载体pGenesil-ZP31和真核表达质粒p-ACLC一起通过尾静脉大容量快速注射法(Hydrodynamics-baged transfection method,HD法)共注射小鼠.[结果]半定量RT-PCR和real-time PCR结果表明,2种质粒共注射时,pGenesil-ZP31的干涉作用至少发生在注射后的8 h到10 d之间;顺序性注射实验中,注射pGenesil-ZP31后间隔8 h和1 d再注射p-ACLC时,pGenesil-ZP31能在一定程度上干涉lZP3 mRNA的表达,间隔3 d以后lZP3 mRNA的表达几乎不受影响,未出现干涉现象.而注射p-ACLC后间隔1 h、2 h、4 h和8 h再注射pGenesil-ZP31,lZP3mRNA的表达也受到了抑制,间隔24 h时抑制现象则消失;[结论]以载体为基础的体内RNAi过程具有时间依赖性,为在卵母细胞水平进一步研究siRNA对lZP3的干涉机制提供借鉴.
[目的]為探索新疆草原兔尾鼠(Lagurus lagurus)卵透明帶3(lZP3)在精卵結閤中的機理,有效的控製草原兔尾鼠的生育;[方法]將RNA榦擾載體pGenesil-ZP31和真覈錶達質粒p-ACLC一起通過尾靜脈大容量快速註射法(Hydrodynamics-baged transfection method,HD法)共註射小鼠.[結果]半定量RT-PCR和real-time PCR結果錶明,2種質粒共註射時,pGenesil-ZP31的榦涉作用至少髮生在註射後的8 h到10 d之間;順序性註射實驗中,註射pGenesil-ZP31後間隔8 h和1 d再註射p-ACLC時,pGenesil-ZP31能在一定程度上榦涉lZP3 mRNA的錶達,間隔3 d以後lZP3 mRNA的錶達幾乎不受影響,未齣現榦涉現象.而註射p-ACLC後間隔1 h、2 h、4 h和8 h再註射pGenesil-ZP31,lZP3mRNA的錶達也受到瞭抑製,間隔24 h時抑製現象則消失;[結論]以載體為基礎的體內RNAi過程具有時間依賴性,為在卵母細胞水平進一步研究siRNA對lZP3的榦涉機製提供藉鑒.
[목적]위탐색신강초원토미서(Lagurus lagurus)란투명대3(lZP3)재정란결합중적궤리,유효적공제초원토미서적생육;[방법]장RNA간우재체pGenesil-ZP31화진핵표체질립p-ACLC일기통과미정맥대용량쾌속주사법(Hydrodynamics-baged transfection method,HD법)공주사소서.[결과]반정량RT-PCR화real-time PCR결과표명,2충질립공주사시,pGenesil-ZP31적간섭작용지소발생재주사후적8 h도10 d지간;순서성주사실험중,주사pGenesil-ZP31후간격8 h화1 d재주사p-ACLC시,pGenesil-ZP31능재일정정도상간섭lZP3 mRNA적표체,간격3 d이후lZP3 mRNA적표체궤호불수영향,미출현간섭현상.이주사p-ACLC후간격1 h、2 h、4 h화8 h재주사pGenesil-ZP31,lZP3mRNA적표체야수도료억제,간격24 h시억제현상칙소실;[결론]이재체위기출적체내RNAi과정구유시간의뢰성,위재란모세포수평진일보연구siRNA대lZP3적간섭궤제제공차감.
