现代检验医学杂志
現代檢驗醫學雜誌
현대검험의학잡지
JOURNAL OF MODERN LABORATORY MEDICINE
2008年
4期
1-3
,共3页
彭佳%王国华%陈坤%宋晓国%张贺秋%周见远%何竞
彭佳%王國華%陳坤%宋曉國%張賀鞦%週見遠%何競
팽가%왕국화%진곤%송효국%장하추%주견원%하경
核心链霉亲和素%克隆%表达
覈心鏈黴親和素%剋隆%錶達
핵심련매친화소%극륭%표체
目的 克隆、表达核心链霉亲和素(core-strepavidin,core-SA)基因.方法 人工合成核心链霉亲和素基因;克隆到pET22b原核表达载体中,转化大肠埃希氏菌BL21,IPTG诱导表达后进行SDS-PAGE分析;目的 蛋白经Ni-NTA亲和层析纯化,采用改良过碘酸钠法标记HRP,ELISA法检测比较HRP-SA与商品化HRP-SA的活性.结果 人工合成的354bp DNA片段经测序确证为核心链霉亲和素基因.将构建的重组表达质粒pET 22b-core SA转化大肠埃希氏菌BL21,经IPTG诱导后得到可溶性的表达产物.SDS-PAGE显示目的 蛋白相对分子质量为14 000,与理论值相符.在非变性条件下纯化目的 蛋白,经HRP标记后用ELISA法检测,结果 表明自制的HRP-SA与商品化HRP-SA的活性相当.结论 成功克隆和表达了核心链霉亲和素基因.
目的 剋隆、錶達覈心鏈黴親和素(core-strepavidin,core-SA)基因.方法 人工閤成覈心鏈黴親和素基因;剋隆到pET22b原覈錶達載體中,轉化大腸埃希氏菌BL21,IPTG誘導錶達後進行SDS-PAGE分析;目的 蛋白經Ni-NTA親和層析純化,採用改良過碘痠鈉法標記HRP,ELISA法檢測比較HRP-SA與商品化HRP-SA的活性.結果 人工閤成的354bp DNA片段經測序確證為覈心鏈黴親和素基因.將構建的重組錶達質粒pET 22b-core SA轉化大腸埃希氏菌BL21,經IPTG誘導後得到可溶性的錶達產物.SDS-PAGE顯示目的 蛋白相對分子質量為14 000,與理論值相符.在非變性條件下純化目的 蛋白,經HRP標記後用ELISA法檢測,結果 錶明自製的HRP-SA與商品化HRP-SA的活性相噹.結論 成功剋隆和錶達瞭覈心鏈黴親和素基因.
목적 극륭、표체핵심련매친화소(core-strepavidin,core-SA)기인.방법 인공합성핵심련매친화소기인;극륭도pET22b원핵표체재체중,전화대장애희씨균BL21,IPTG유도표체후진행SDS-PAGE분석;목적 단백경Ni-NTA친화층석순화,채용개량과전산납법표기HRP,ELISA법검측비교HRP-SA여상품화HRP-SA적활성.결과 인공합성적354bp DNA편단경측서학증위핵심련매친화소기인.장구건적중조표체질립pET 22b-core SA전화대장애희씨균BL21,경IPTG유도후득도가용성적표체산물.SDS-PAGE현시목적 단백상대분자질량위14 000,여이론치상부.재비변성조건하순화목적 단백,경HRP표기후용ELISA법검측,결과 표명자제적HRP-SA여상품화HRP-SA적활성상당.결론 성공극륭화표체료핵심련매친화소기인.
