CAJ | 학술논문

于2005-06,2007-09在南昌大学第二附属医院江西省分子医学重点实验室拟建立一种在无血清培养条件下诱导脐血间充质干细胞向神经细胞分化的方法.所用无血清培养基血清替代物是将纯化人转铁蛋白直接溶于DMEM培养基金,再将去毒后的BSA、超声波粉碎后的胆固醇、胰岛素及过氧化氢酶直接加入DMEM培养基中稀释至所需浓度.体外分离的脐血单个核细胞以1×109 L-1接种,加入含氢化可的松、纤维连接蛋白的无血清培养基,7d后消化传代.取传至2,5,8代的脐血间充质干细胞,达60%～70%融合时以含β-巯基乙醇、丁化羟基苯甲醚的无血清培养基诱导其向神经细胞分化.结果在无血清条件下能培养扩增出大蕈脐血间充质干细胞,融合后可继续传代扩增;不表达CD34、CD13和CD45,强表达CD166、CD29、CD105.较强表达CD54,80%以上细胞处于G0G1期;脐血间充质干细胞经诱导后,能形成具有典型神经元形态的神经细胞,神经元特异性烯醇化酶、神经丝蛋白、神经胶质元纤维酸性蛋白均呈阳性表达.提示在自行研制的无血清培养条件下可成功诱导脐血间充质干细胞向神经细胞分化.
우2005-06,2007-09재남창대학제이부속의원강서성분자의학중점실험실의건립일충재무혈청배양조건하유도제혈간충질간세포향신경세포분화적방법.소용무혈청배양기혈청체대물시장순화인전철단백직접용우DMEM배양기금,재장거독후적BSA、초성파분쇄후적담고순、이도소급과양화경매직접가입DMEM배양기중희석지소수농도.체외분리적제혈단개핵세포이1×109 L-1접충,가입함경화가적송、섬유련접단백적무혈청배양기,7d후소화전대.취전지2,5,8대적제혈간충질간세포,체60%～70%융합시이함β-구기을순、정화간기분갑미적무혈청배양기유도기향신경세포분화.결과재무혈청조건하능배양확증출대심제혈간충질간세포,융합후가계속전대확증;불표체CD34、CD13화CD45,강표체CD166、CD29、CD105.교강표체CD54,80%이상세포처우G0G1기;제혈간충질간세포경유도후,능형성구유전형신경원형태적신경세포,신경원특이성희순화매、신경사단백、신경효질원섬유산성단백균정양성표체.제시재자행연제적무혈청배양조건하가성공유도제혈간충질간세포향신경세포분화.