食用菌学报
食用菌學報
식용균학보
ACTA EDULIS FUNGI
2009年
1期
26-30
,共5页
罗志姣%蔡为明%李南羿%吴坤
囉誌姣%蔡為明%李南羿%吳坤
라지교%채위명%리남예%오곤
香菇%差异表达%显示体系%银染
香菇%差異錶達%顯示體繫%銀染
향고%차이표체%현시체계%은염
为建立适用于研究香菇(Lentinula edodes)分化中基因表达差异的银染差异显示方法,以香菇突变株fbd1及其出发菌株98411的菌丝体和子实体为材料,采用Trizol法提取总RNA,优化了反转录和PCR扩增中5项反应参数,再经6%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离和银染显示差异条带.试验结果表明,适宜分析香菇mRNA差异的反转录体系中RNA投入量为0.5～1 μg、dNTP浓度为20 μmol/L,PCR扩增反应MgCl2、dNTP和Taq酶分别为2 mmol/L、200 μmol/L和1.0 U,此条件下,目标条带清晰且重复性好.
為建立適用于研究香菇(Lentinula edodes)分化中基因錶達差異的銀染差異顯示方法,以香菇突變株fbd1及其齣髮菌株98411的菌絲體和子實體為材料,採用Trizol法提取總RNA,優化瞭反轉錄和PCR擴增中5項反應參數,再經6%變性聚丙烯酰胺凝膠電泳分離和銀染顯示差異條帶.試驗結果錶明,適宜分析香菇mRNA差異的反轉錄體繫中RNA投入量為0.5～1 μg、dNTP濃度為20 μmol/L,PCR擴增反應MgCl2、dNTP和Taq酶分彆為2 mmol/L、200 μmol/L和1.0 U,此條件下,目標條帶清晰且重複性好.
위건립괄용우연구향고(Lentinula edodes)분화중기인표체차이적은염차이현시방법,이향고돌변주fbd1급기출발균주98411적균사체화자실체위재료,채용Trizol법제취총RNA,우화료반전록화PCR확증중5항반응삼수,재경6%변성취병희선알응효전영분리화은염현시차이조대.시험결과표명,괄의분석향고mRNA차이적반전록체계중RNA투입량위0.5～1 μg、dNTP농도위20 μmol/L,PCR확증반응MgCl2、dNTP화Taq매분별위2 mmol/L、200 μmol/L화1.0 U,차조건하,목표조대청석차중복성호.
