四川大学学报(自然科学版)
四川大學學報(自然科學版)
사천대학학보(자연과학판)
JOURNAL OF SICHUAN UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2009年
5期
1537-1542
,共6页
倪睿%严飞%袁铸%李炯%文艳君
倪睿%嚴飛%袁鑄%李炯%文豔君
예예%엄비%원주%리형%문염군
PNAS-4%基因治疗%腺病毒%肿瘤%凋亡
PNAS-4%基因治療%腺病毒%腫瘤%凋亡
PNAS-4%기인치료%선병독%종류%조망
用RT-PCR从A293细胞中克隆hPNAS-4编码区cDNA,将其酶切后连接至pENTR11载体上,再通过同源重组作用将hPNAS-4基因片段重组至腺病毒骨架载体上,构建腺病毒重组质粒,最后经293细胞的包装扩增后得到携带hPNAS-4基因的重组腺病毒;将重组腺病毒体外感染人肺癌A549细胞;RT-PCR测得感染细胞中hPNAS-4表达明显上调,MTT测得细胞增殖受到明显抑制,流式细胞仪测得细胞凋亡率明显升高,琼脂糖凝胶电泳显示其基因组DNA有明显的梯状条带.以上结果表明hPNAS-4过表达对A549肿瘤细胞的生长有明显的抑制和诱导凋亡作用.
用RT-PCR從A293細胞中剋隆hPNAS-4編碼區cDNA,將其酶切後連接至pENTR11載體上,再通過同源重組作用將hPNAS-4基因片段重組至腺病毒骨架載體上,構建腺病毒重組質粒,最後經293細胞的包裝擴增後得到攜帶hPNAS-4基因的重組腺病毒;將重組腺病毒體外感染人肺癌A549細胞;RT-PCR測得感染細胞中hPNAS-4錶達明顯上調,MTT測得細胞增殖受到明顯抑製,流式細胞儀測得細胞凋亡率明顯升高,瓊脂糖凝膠電泳顯示其基因組DNA有明顯的梯狀條帶.以上結果錶明hPNAS-4過錶達對A549腫瘤細胞的生長有明顯的抑製和誘導凋亡作用.
용RT-PCR종A293세포중극륭hPNAS-4편마구cDNA,장기매절후련접지pENTR11재체상,재통과동원중조작용장hPNAS-4기인편단중조지선병독골가재체상,구건선병독중조질립,최후경293세포적포장확증후득도휴대hPNAS-4기인적중조선병독;장중조선병독체외감염인폐암A549세포;RT-PCR측득감염세포중hPNAS-4표체명현상조,MTT측득세포증식수도명현억제,류식세포의측득세포조망솔명현승고,경지당응효전영현시기기인조DNA유명현적제상조대.이상결과표명hPNAS-4과표체대A549종류세포적생장유명현적억제화유도조망작용.