蚌埠医学院学报
蚌埠醫學院學報
방부의학원학보
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE BENGBU
2010年
10期
982-985
,共4页
干细胞,间充质%脐带%分离%培养%淋巴细胞
榦細胞,間充質%臍帶%分離%培養%淋巴細胞
간세포,간충질%제대%분리%배양%림파세포
目的:建立从人的脐带组织中分离和培养脐带间充质干细胞(UC-MSCs)的方法,并探讨UC-MSCs的生物学特性. 方法:分别采用原代贴壁培养法和酶消化法(胶原酶Ⅱ和胰酶)分离培养UC-MSCs,瑞氏染色观察细胞形态,流式细胞术检测第3代以后的UC-MSCs表面特异标志物表达,MTT法检测P7细胞增殖情况.UC-MSCs同外周血单个核细胞共培养后,用MTT法测定细胞增殖率,Hoechst与PI双染色,观察UC-MSCs对健康人淋巴细胞增殖的影响.结果:原代贴壁培养法1周左右可见成纤维样细胞从组织块边缘爬出,成簇生长;酶消化法3～5天可见成纤维样细胞均匀生长.传代培养后,UC-MSCs均呈长梭形、旋涡状生长;细胞核大,核仁清晰;免疫表型:CD29阳性率为(95.71±2.23)%,CD31和CD34阳性率分别为(2.47±0.54)%和(3.24±0.34)%;第7代UC-MSCs仍具有较强的分裂增殖能力.UC-MSCs对淋巴细胞的增殖反应具有抑制作用,呈细胞数量剂量依赖性,而淋巴细胞对UC-MSCs的生长未见影响.结论:从人脐带中成功分离培养的细胞具有UC-MSCs生物学特性.
目的:建立從人的臍帶組織中分離和培養臍帶間充質榦細胞(UC-MSCs)的方法,併探討UC-MSCs的生物學特性. 方法:分彆採用原代貼壁培養法和酶消化法(膠原酶Ⅱ和胰酶)分離培養UC-MSCs,瑞氏染色觀察細胞形態,流式細胞術檢測第3代以後的UC-MSCs錶麵特異標誌物錶達,MTT法檢測P7細胞增殖情況.UC-MSCs同外週血單箇覈細胞共培養後,用MTT法測定細胞增殖率,Hoechst與PI雙染色,觀察UC-MSCs對健康人淋巴細胞增殖的影響.結果:原代貼壁培養法1週左右可見成纖維樣細胞從組織塊邊緣爬齣,成簇生長;酶消化法3～5天可見成纖維樣細胞均勻生長.傳代培養後,UC-MSCs均呈長梭形、鏇渦狀生長;細胞覈大,覈仁清晰;免疫錶型:CD29暘性率為(95.71±2.23)%,CD31和CD34暘性率分彆為(2.47±0.54)%和(3.24±0.34)%;第7代UC-MSCs仍具有較彊的分裂增殖能力.UC-MSCs對淋巴細胞的增殖反應具有抑製作用,呈細胞數量劑量依賴性,而淋巴細胞對UC-MSCs的生長未見影響.結論:從人臍帶中成功分離培養的細胞具有UC-MSCs生物學特性.
목적:건립종인적제대조직중분리화배양제대간충질간세포(UC-MSCs)적방법,병탐토UC-MSCs적생물학특성. 방법:분별채용원대첩벽배양법화매소화법(효원매Ⅱ화이매)분리배양UC-MSCs,서씨염색관찰세포형태,류식세포술검측제3대이후적UC-MSCs표면특이표지물표체,MTT법검측P7세포증식정황.UC-MSCs동외주혈단개핵세포공배양후,용MTT법측정세포증식솔,Hoechst여PI쌍염색,관찰UC-MSCs대건강인림파세포증식적영향.결과:원대첩벽배양법1주좌우가견성섬유양세포종조직괴변연파출,성족생장;매소화법3～5천가견성섬유양세포균균생장.전대배양후,UC-MSCs균정장사형、선와상생장;세포핵대,핵인청석;면역표형:CD29양성솔위(95.71±2.23)%,CD31화CD34양성솔분별위(2.47±0.54)%화(3.24±0.34)%;제7대UC-MSCs잉구유교강적분렬증식능력.UC-MSCs대림파세포적증식반응구유억제작용,정세포수량제량의뢰성,이림파세포대UC-MSCs적생장미견영향.결론:종인제대중성공분리배양적세포구유UC-MSCs생물학특성.
