分子植物育种
分子植物育種
분자식물육충
MOLECULAR PLANT BREEDING
2005年
3期
445-450
,共6页
谢运海%夏德安%姜静%林萍
謝運海%夏德安%薑靜%林萍
사운해%하덕안%강정%림평
正交设计%ISSR-PCR%水曲柳
正交設計%ISSR-PCR%水麯柳
정교설계%ISSR-PCR%수곡류
利用正交设计L16(45)对水曲柳ISSR-PCR反应体系的5因素(Taq酶,Mg2+,模板DNA,dNTP,引物)在4个水平上进行优化试验,PCR结果用统计软件MINITAB分析:①各因素的不同水平对PCR反应结果都有显著的影响,其中Taq酶量影响最大;②筛选出各反应因素的最佳水平,建立水曲柳ISSR-PCR反应的最佳体系(20μl)为:Taq酶1.0U,Mg2+2.0mmol/L,模板DNA 50～200ng,dNTP 0.15mmol/L,引物0.3μmol/L.最后,对水曲柳ISSR-PCR最佳反应体系进行梯度退火,得到最佳退火温度为58.3℃.这一优化系统的建立为今后利用ISSR标记技术,研究水曲柳的地理变异提供一个标准化程序.
利用正交設計L16(45)對水麯柳ISSR-PCR反應體繫的5因素(Taq酶,Mg2+,模闆DNA,dNTP,引物)在4箇水平上進行優化試驗,PCR結果用統計軟件MINITAB分析:①各因素的不同水平對PCR反應結果都有顯著的影響,其中Taq酶量影響最大;②篩選齣各反應因素的最佳水平,建立水麯柳ISSR-PCR反應的最佳體繫(20μl)為:Taq酶1.0U,Mg2+2.0mmol/L,模闆DNA 50～200ng,dNTP 0.15mmol/L,引物0.3μmol/L.最後,對水麯柳ISSR-PCR最佳反應體繫進行梯度退火,得到最佳退火溫度為58.3℃.這一優化繫統的建立為今後利用ISSR標記技術,研究水麯柳的地理變異提供一箇標準化程序.
이용정교설계L16(45)대수곡류ISSR-PCR반응체계적5인소(Taq매,Mg2+,모판DNA,dNTP,인물)재4개수평상진행우화시험,PCR결과용통계연건MINITAB분석:①각인소적불동수평대PCR반응결과도유현저적영향,기중Taq매량영향최대;②사선출각반응인소적최가수평,건립수곡류ISSR-PCR반응적최가체계(20μl)위:Taq매1.0U,Mg2+2.0mmol/L,모판DNA 50～200ng,dNTP 0.15mmol/L,인물0.3μmol/L.최후,대수곡류ISSR-PCR최가반응체계진행제도퇴화,득도최가퇴화온도위58.3℃.저일우화계통적건립위금후이용ISSR표기기술,연구수곡류적지리변이제공일개표준화정서.
