CAJ | 학술논문

背景:研究已证明,骨髓间充质干细胞在体内、体外均可转化为肝细胞样细胞,并具有肝细胞的合成和分泌功能.目的:将骨髓间充质干细胞诱导分化的肝样细胞移植到同种大鼠已纤维化的肝脏,观察其分布、分化情况及对肝功能的影响.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2007-06/2008-03在泸州医学院附属医院实验室完成.材料:100 g清洁级雄性SD大鼠10只用于分离培养骨髓间充质干细胞并诱导分化为肝样细胞.200～250 g清洁级雄性SD大鼠75只,随机分为肝样细胞移植组30只,模型对照组30只,正常对照组15只.肝样细胞移植组及模型对照组大鼠腹腔注射四氯化碳制备肝纤维化动物模型.方法:模型对照组和正常对照组大鼠门静脉输注不含血清的低糖DMEM培养基,肝样细胞移植组输入DAPI标记的肝样细胞,移植后第1,2,3,4周处死大鼠,留取肝脏和血清标本.主要观察指标:肝组织Masson三重染色分期评估纤维化程度.肝脏冰冻切片荧光显微镜下观察肝样移植细胞定居情况.以全自动生化分析仪与放射免疫法检测血清肝功能指标和血清肝纤维化指标.结果:肝样移植细胞逐渐从血管进入肝脏实质,最终散布于肝细胞间,移植3周后,荧光衰减明显.移植后第2周,肝组织中的假小叶逐渐吸收或消散,纤维化程度明显轻于模型对照组,胶原染色变浅,分布于纤维间隔和汇管区,肝细胞呈气球样变性.移植后第4周肝细胞排列接近正常,偶见点状坏死,无纤维间隔,血清肝功能指标和肝纤维化指标与正常对照组相比,差异无显著性意义(P0.05).结论:诱导的肝样细胞植入纤维化的肝组织后,细胞可停留于汇管区和肝细胞素,植入细胞最早可见于移植后第7天,血生化检查结果提示植入诱导的肝样细胞能够部分替代肝细胞的功能.
배경:연구이증명,골수간충질간세포재체내、체외균가전화위간세포양세포,병구유간세포적합성화분비공능.목적:장골수간충질간세포유도분화적간양세포이식도동충대서이섬유화적간장,관찰기분포、분화정황급대간공능적영향.설계、시간급지점:수궤대조동물실험,우2007-06/2008-03재로주의학원부속의원실험실완성.재료:100 g청길급웅성SD대서10지용우분리배양골수간충질간세포병유도분화위간양세포.200～250 g청길급웅성SD대서75지,수궤분위간양세포이식조30지,모형대조조30지,정상대조조15지.간양세포이식조급모형대조조대서복강주사사록화탄제비간섬유화동물모형.방법:모형대조조화정상대조조대서문정맥수주불함혈청적저당DMEM배양기,간양세포이식조수입DAPI표기적간양세포,이식후제1,2,3,4주처사대서,류취간장화혈청표본.주요관찰지표:간조직Masson삼중염색분기평고섬유화정도.간장빙동절편형광현미경하관찰간양이식세포정거정황.이전자동생화분석의여방사면역법검측혈청간공능지표화혈청간섬유화지표.결과:간양이식세포축점종혈관진입간장실질,최종산포우간세포간,이식3주후,형광쇠감명현.이식후제2주,간조직중적가소협축점흡수혹소산,섬유화정도명현경우모형대조조,효원염색변천,분포우섬유간격화회관구,간세포정기구양변성.이식후제4주간세포배렬접근정상,우견점상배사,무섬유간격,혈청간공능지표화간섬유화지표여정상대조조상비,차이무현저성의의(P0.05).결론:유도적간양세포식입섬유화적간조직후,세포가정류우회관구화간세포소,식입세포최조가견우이식후제7천,혈생화검사결과제시식입유도적간양세포능구부분체대간세포적공능.