遵义医学院学报
遵義醫學院學報
준의의학원학보
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE ZUNYI
2011年
4期
351-353
,共3页
陈富超%曹明燕%罗军敏%封建凯%孙万邦
陳富超%曹明燕%囉軍敏%封建凱%孫萬邦
진부초%조명연%라군민%봉건개%손만방
重组人IL-10%X-33%SMD1168%表达
重組人IL-10%X-33%SMD1168%錶達
중조인IL-10%X-33%SMD1168%표체
目的 研究重组人IL-10 (rhlL-10)在两株毕赤酵母X-33和SMD1168的表达水平,为rhlL-10的表达选择合适的表达菌株.方法以0.5%甲醇分别诱导毕赤酵母X-33和SMD 1168表达rhlL-10,用SDS-PAGE和WesternBlot分析和鉴定rhlL-10,用ELISA法测定培养液rhlL-10含量,用Bradford法测定培养液总蛋白含量并计算rhlL-10占总蛋白的比例.比较同等培养条件下两株酵母表达rhlL-10和总蛋白的水平.结果SDS-PAGE和Western Blot均检测到42kD左右的蛋白条带；rhIL-10在X-33中的表达量平均达20.00mg/L,在SMD1168中的表达量平均达1.90mg/L,在两株不同酵母中的表达量有显著性差异(P＜0.05):同时段的X-33培养液中总蛋白质含量平均为50.00mg/L,rhlL-10占总蛋白的40.00%; SMD 1168培养液中总蛋白质含量平均为48.23mg/L,rhIL-10占总蛋白的4.00%.结论rhlL-10在不同的毕赤酵母表达效率有差异,X-33较1168更适于rhIL-10的表达.
目的 研究重組人IL-10 (rhlL-10)在兩株畢赤酵母X-33和SMD1168的錶達水平,為rhlL-10的錶達選擇閤適的錶達菌株.方法以0.5%甲醇分彆誘導畢赤酵母X-33和SMD 1168錶達rhlL-10,用SDS-PAGE和WesternBlot分析和鑒定rhlL-10,用ELISA法測定培養液rhlL-10含量,用Bradford法測定培養液總蛋白含量併計算rhlL-10佔總蛋白的比例.比較同等培養條件下兩株酵母錶達rhlL-10和總蛋白的水平.結果SDS-PAGE和Western Blot均檢測到42kD左右的蛋白條帶；rhIL-10在X-33中的錶達量平均達20.00mg/L,在SMD1168中的錶達量平均達1.90mg/L,在兩株不同酵母中的錶達量有顯著性差異(P＜0.05):同時段的X-33培養液中總蛋白質含量平均為50.00mg/L,rhlL-10佔總蛋白的40.00%; SMD 1168培養液中總蛋白質含量平均為48.23mg/L,rhIL-10佔總蛋白的4.00%.結論rhlL-10在不同的畢赤酵母錶達效率有差異,X-33較1168更適于rhIL-10的錶達.
목적 연구중조인IL-10 (rhlL-10)재량주필적효모X-33화SMD1168적표체수평,위rhlL-10적표체선택합괄적표체균주.방법이0.5%갑순분별유도필적효모X-33화SMD 1168표체rhlL-10,용SDS-PAGE화WesternBlot분석화감정rhlL-10,용ELISA법측정배양액rhlL-10함량,용Bradford법측정배양액총단백함량병계산rhlL-10점총단백적비례.비교동등배양조건하량주효모표체rhlL-10화총단백적수평.결과SDS-PAGE화Western Blot균검측도42kD좌우적단백조대；rhIL-10재X-33중적표체량평균체20.00mg/L,재SMD1168중적표체량평균체1.90mg/L,재량주불동효모중적표체량유현저성차이(P＜0.05):동시단적X-33배양액중총단백질함량평균위50.00mg/L,rhlL-10점총단백적40.00%; SMD 1168배양액중총단백질함량평균위48.23mg/L,rhIL-10점총단백적4.00%.결론rhlL-10재불동적필적효모표체효솔유차이,X-33교1168경괄우rhIL-10적표체.
