CAJ | 학술논문

目的探讨晚期糖基化终产物对大鼠腹膜间皮细胞上皮-间叶转化(EMT)的影响,建立大鼠腹膜间皮细胞EMT模型.方法体外培养的大鼠腹膜间皮细胞经含40 mmol/L晚期糖基化终产物(AGEs)、80 mmol/L AGEs的M199培养基分别培养48、72 h；以正常M199培养基和含80 mmol/L BSA的M199培养基为对照.采用相差显微镜观察细胞形态学改变,应用实时定量PCR法检测间皮细胞E-cadherin、α-SMA、Collagen I、TGF-β1、VEGF mRNA的表达；应用Western blot检测E-cadherin、α-SMA蛋白的表达；应用ELISA法检测间皮细胞TGF-β1、VEGF蛋白表达水平.结果 ①AGEs(40 mmol/L、80 mmol/L)刺激后,大鼠腹膜间皮细胞由典型的上皮细胞形态逐渐变为梭形及不规则形,类似肌成纤维细胞；②AGEs (40 mmol/L、80mmol/L)刺激后,大鼠腹膜间皮细胞α-SMA、Collagen I、TGF-β1、VEGF mRNA和α-SMA、TGF-β、VEGF蛋白表达水平显著增加(P＜0.05)；③AGEs(40 mmol/L、80 mmol/L)刺激后,大鼠腹膜间皮细胞E-cadherin mRNA和E-cadherin蛋白表达水平显著下降(P＜0.05).结论 AGEs能上调α-SMA、Collagen I、TGF-β、VEGF表达和下调E-cadherin表达,AGEs诱导大鼠腹膜间皮细胞EMT.
목적 탐토만기당기화종산물대대서복막간피세포상피-간협전화(EMT)적영향,건립대서복막간피세포EMT모형.방법 체외배양적대서복막간피세포경함40 mmol/L만기당기화종산물(AGEs)、80 mmol/L AGEs적M199배양기분별배양48、72 h；이정상M199배양기화함80 mmol/L BSA적M199배양기위대조.채용상차현미경관찰세포형태학개변,응용실시정량PCR법검측간피세포E-cadherin、α-SMA、Collagen I、TGF-β1、VEGF mRNA적표체；응용Western blot검측E-cadherin、α-SMA단백적표체；응용ELISA법검측간피세포TGF-β1、VEGF단백표체수평.결과 ①AGEs(40 mmol/L、80 mmol/L)자격후,대서복막간피세포유전형적상피세포형태축점변위사형급불규칙형,유사기성섬유세포；②AGEs (40 mmol/L、80mmol/L)자격후,대서복막간피세포α-SMA、Collagen I、TGF-β1、VEGF mRNA화α-SMA、TGF-β、VEGF단백표체수평현저증가(P＜0.05)；③AGEs(40 mmol/L、80 mmol/L)자격후,대서복막간피세포E-cadherin mRNA화E-cadherin단백표체수평현저하강(P＜0.05).결론 AGEs능상조α-SMA、Collagen I、TGF-β、VEGF표체화하조E-cadherin표체,AGEs유도대서복막간피세포EMT.