生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2012年
2期
232-237,266
,共7页
许志茹%佟玲%侯杰%崔国新
許誌茹%佟玲%侯傑%崔國新
허지여%동령%후걸%최국신
芜菁%UDP-葡萄糖%类黄酮3-O-葡萄糖基转移酶%基因克隆%序列分析%基因表达
蕪菁%UDP-葡萄糖%類黃酮3-O-葡萄糖基轉移酶%基因剋隆%序列分析%基因錶達
무정%UDP-포도당%류황동3-O-포도당기전이매%기인극륭%서렬분석%기인표체
目的:克隆‘津田’芜菁和‘赤丸’芜菁的UDP-葡萄糖:类黄酮3-0-葡萄糖基转移酶(UF3GT)基因并研究其表达特性.方法:利用RT-PCR方法克隆‘津田’芜菁BrUF3GT1基因和‘赤丸’芜菁BrUF3GT2基因,并进行生物信息学分析;通过Northern杂交检测BrUF3GT1和BrUF3GT2基因的UV-A诱导表达特性；对BrUF3GT1和BrUF3GT2基因进行原核诱导表达.结果:BrUF3GT1和BrUF3GT2的开放读框为1407 bp,编码468个氨基酸残基；氨基酸序列分析显示,BrUF3GT1和BrUF3GT2与拟南芥UF3GT的同源性为87％,从第16～453位氨基酸残基的肽段具有糖基转移酶家族成员的结构域；BrUF3GT1和BrUF3GT2基因具有高度同源性,核苷酸序列在7个位点存在差异,推导的氨基酸序列在1个位点存在差异；Northern杂交结果显示,UV-A可以诱导BrUF3GT1和BrUF3GT2基因表达,基因的表达量与处理时间相关；原核诱导表达及纯化后可以获得相对分子质量分别约为51.88× 103和51.89×10的BrUF3GT1和BrUF3GT2蛋白.结论:克隆了‘津田’芜菁和‘赤丸’芜菁的UF3GT基因,为初步阐明2种芜菁的花青素生物合成机理奠定了实验基础.
目的:剋隆‘津田’蕪菁和‘赤汍’蕪菁的UDP-葡萄糖:類黃酮3-0-葡萄糖基轉移酶(UF3GT)基因併研究其錶達特性.方法:利用RT-PCR方法剋隆‘津田’蕪菁BrUF3GT1基因和‘赤汍’蕪菁BrUF3GT2基因,併進行生物信息學分析;通過Northern雜交檢測BrUF3GT1和BrUF3GT2基因的UV-A誘導錶達特性；對BrUF3GT1和BrUF3GT2基因進行原覈誘導錶達.結果:BrUF3GT1和BrUF3GT2的開放讀框為1407 bp,編碼468箇氨基痠殘基；氨基痠序列分析顯示,BrUF3GT1和BrUF3GT2與擬南芥UF3GT的同源性為87％,從第16～453位氨基痠殘基的肽段具有糖基轉移酶傢族成員的結構域；BrUF3GT1和BrUF3GT2基因具有高度同源性,覈苷痠序列在7箇位點存在差異,推導的氨基痠序列在1箇位點存在差異；Northern雜交結果顯示,UV-A可以誘導BrUF3GT1和BrUF3GT2基因錶達,基因的錶達量與處理時間相關；原覈誘導錶達及純化後可以穫得相對分子質量分彆約為51.88× 103和51.89×10的BrUF3GT1和BrUF3GT2蛋白.結論:剋隆瞭‘津田’蕪菁和‘赤汍’蕪菁的UF3GT基因,為初步闡明2種蕪菁的花青素生物閤成機理奠定瞭實驗基礎.
목적:극륭‘진전’무정화‘적환’무정적UDP-포도당:류황동3-0-포도당기전이매(UF3GT)기인병연구기표체특성.방법:이용RT-PCR방법극륭‘진전’무정BrUF3GT1기인화‘적환’무정BrUF3GT2기인,병진행생물신식학분석;통과Northern잡교검측BrUF3GT1화BrUF3GT2기인적UV-A유도표체특성；대BrUF3GT1화BrUF3GT2기인진행원핵유도표체.결과:BrUF3GT1화BrUF3GT2적개방독광위1407 bp,편마468개안기산잔기；안기산서렬분석현시,BrUF3GT1화BrUF3GT2여의남개UF3GT적동원성위87％,종제16～453위안기산잔기적태단구유당기전이매가족성원적결구역；BrUF3GT1화BrUF3GT2기인구유고도동원성,핵감산서렬재7개위점존재차이,추도적안기산서렬재1개위점존재차이；Northern잡교결과현시,UV-A가이유도BrUF3GT1화BrUF3GT2기인표체,기인적표체량여처리시간상관；원핵유도표체급순화후가이획득상대분자질량분별약위51.88× 103화51.89×10적BrUF3GT1화BrUF3GT2단백.결론:극륭료‘진전’무정화‘적환’무정적UF3GT기인,위초보천명2충무정적화청소생물합성궤리전정료실험기출.
