中华肝脏病杂志
中華肝髒病雜誌
중화간장병잡지
CHINESE JOURNAL OF HEPATOLOGY
2012年
4期
270-274
,共5页
史俊林%曹骥%苏建家%杨春%欧超%汪多平%李瑗
史俊林%曹驥%囌建傢%楊春%歐超%汪多平%李瑗
사준림%조기%소건가%양춘%구초%왕다평%리원
癌,肝细胞%树鼩属%大鼠%基因%表皮型脂肪酸结合蛋白
癌,肝細胞%樹鼩屬%大鼠%基因%錶皮型脂肪痠結閤蛋白
암,간세포%수구속%대서%기인%표피형지방산결합단백
Carcinoma,hepatocellular%Tupaia%Rats%Gene%Epidermal fatty acid binding protein
目的 应用跨种属肿瘤关键基因筛选策略,从已报道的大量肝癌相关基因中筛选、定位出影响肝癌发生和发展的关键分子.方法 结合本课题组的前期实验数据及国内外文献数据,建立肝癌差异表达分子的跨种属数据集;对首批筛选出的候选分子表皮型脂肪酸结合蛋白(E-FABP),应用RT-PCR和Western blot技术,分别验证其在人、树鼩和大鼠的肝癌、癌旁及正常肝组织中mRNA和蛋白水平的差异表达情况.实验数据以均数±标准差((x)±s)表示,采用单因素方差分析. 结果 初步建成跨种属肝癌差异表达数据集,RT-PCR检测结果显示E-FABP mRNA在人肝癌及其癌旁组织和正常肝组织中的相对表达量分别为0.87±0.14、0.64±0.12和0.67±0.07;在树鼩肝癌及其癌旁组织和正常肝组织中的相对表达量分别为0.87±0.25、0.73±0.19和0.68±0.19;在大鼠肝癌及其癌旁组织和正常肝组织中的相对表达量分别为0.97±0.22、0.78±0.16和0.80±0.13.人、树鼩和大鼠肝癌组织中的E-FABP mRNA表达水平均显著高于癌旁和正常肝组织,F值分别为20.910、3.807、4.482,P值均<0.05,差异有统计学意义.Wesern blot检测结果显示E-FABP在人、树鼩和大鼠肝癌组织中的蛋白表达水平均较癌旁和正常肝组织显著上调.结论 跨种属肿瘤关键基因筛选策略可能有助于发现肝癌关键基因,E-FABP有可能是影响肝癌发生和发展的重要分子之一.
目的 應用跨種屬腫瘤關鍵基因篩選策略,從已報道的大量肝癌相關基因中篩選、定位齣影響肝癌髮生和髮展的關鍵分子.方法 結閤本課題組的前期實驗數據及國內外文獻數據,建立肝癌差異錶達分子的跨種屬數據集;對首批篩選齣的候選分子錶皮型脂肪痠結閤蛋白(E-FABP),應用RT-PCR和Western blot技術,分彆驗證其在人、樹鼩和大鼠的肝癌、癌徬及正常肝組織中mRNA和蛋白水平的差異錶達情況.實驗數據以均數±標準差((x)±s)錶示,採用單因素方差分析. 結果 初步建成跨種屬肝癌差異錶達數據集,RT-PCR檢測結果顯示E-FABP mRNA在人肝癌及其癌徬組織和正常肝組織中的相對錶達量分彆為0.87±0.14、0.64±0.12和0.67±0.07;在樹鼩肝癌及其癌徬組織和正常肝組織中的相對錶達量分彆為0.87±0.25、0.73±0.19和0.68±0.19;在大鼠肝癌及其癌徬組織和正常肝組織中的相對錶達量分彆為0.97±0.22、0.78±0.16和0.80±0.13.人、樹鼩和大鼠肝癌組織中的E-FABP mRNA錶達水平均顯著高于癌徬和正常肝組織,F值分彆為20.910、3.807、4.482,P值均<0.05,差異有統計學意義.Wesern blot檢測結果顯示E-FABP在人、樹鼩和大鼠肝癌組織中的蛋白錶達水平均較癌徬和正常肝組織顯著上調.結論 跨種屬腫瘤關鍵基因篩選策略可能有助于髮現肝癌關鍵基因,E-FABP有可能是影響肝癌髮生和髮展的重要分子之一.
목적 응용과충속종류관건기인사선책략,종이보도적대량간암상관기인중사선、정위출영향간암발생화발전적관건분자.방법 결합본과제조적전기실험수거급국내외문헌수거,건립간암차이표체분자적과충속수거집;대수비사선출적후선분자표피형지방산결합단백(E-FABP),응용RT-PCR화Western blot기술,분별험증기재인、수구화대서적간암、암방급정상간조직중mRNA화단백수평적차이표체정황.실험수거이균수±표준차((x)±s)표시,채용단인소방차분석. 결과 초보건성과충속간암차이표체수거집,RT-PCR검측결과현시E-FABP mRNA재인간암급기암방조직화정상간조직중적상대표체량분별위0.87±0.14、0.64±0.12화0.67±0.07;재수구간암급기암방조직화정상간조직중적상대표체량분별위0.87±0.25、0.73±0.19화0.68±0.19;재대서간암급기암방조직화정상간조직중적상대표체량분별위0.97±0.22、0.78±0.16화0.80±0.13.인、수구화대서간암조직중적E-FABP mRNA표체수평균현저고우암방화정상간조직,F치분별위20.910、3.807、4.482,P치균<0.05,차이유통계학의의.Wesern blot검측결과현시E-FABP재인、수구화대서간암조직중적단백표체수평균교암방화정상간조직현저상조.결론 과충속종류관건기인사선책략가능유조우발현간암관건기인,E-FABP유가능시영향간암발생화발전적중요분자지일.
Objective To evaluate the utility of the cross-species screening strategy for investigating key molecule(s) involved in onset and progression of hepatocellular carcinoma (HCC).Methods HCC-related molecule data from our previous studies and in the literature were collected to establish a cross-species dataset.Tissue samples ofHCC,non-HCC surrounding liver (para-HCC),and normal liver that were collected from humans,tree shrews and rats.The genes reported to have the most differential expression in HCC were verified by analyzing the mRNA and protein levels by reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) and Western blotting,respectively.Results The cross-species dataset of HCC-related molecules included four genes:epidermal fatty acid-binding protein (E-FABP),liver (L)-FABP,tyrosine a-ketoglutarate transaminase (TKT),and cytokeratin (CK8).In humans,E-FABP mRNA expression was significantly higher (P<0.05) in HCC (0.87±0.14 vs.para-HCC:0.64±0.12 and normal liver:0.67±0.07; F=20.910).Similar results were obtained in tree shrew (HCC:0.87 ± 0.25 vs.para-HCC:0.73 ± 0.19 and nornal liver:0.68 ± 0.19;F=3.807) and rat (HCC:0.97±0.22 vs.para-HCC:0.78±0.16 and normal liver:0.80 ± 0.13;F=4.482).The Western blotting analyses revealed a similar statistically signficant trend.Condusioons The cross-species screening strategy for tumor genes may represent a feasible and convenient process of identifying key molecule(s) for human HCC.E-FABP may be a particularly crucial molecule for hepatocarcinogenesis.