医学研究生学报
醫學研究生學報
의학연구생학보
JOURNAL OF MEDICAL POSTGRADUATE
2004年
8期
688-690
,共3页
别良峰%岳乔红%程晓东%于文彬%苏明权%郝晓柯
彆良峰%嶽喬紅%程曉東%于文彬%囌明權%郝曉柯
별량봉%악교홍%정효동%우문빈%소명권%학효가
高迁移率族蛋白1%血管内皮细胞%肿瘤坏死因子%脓毒症
高遷移率族蛋白1%血管內皮細胞%腫瘤壞死因子%膿毒癥
고천이솔족단백1%혈관내피세포%종류배사인자%농독증
目的:探讨人高迁移率族蛋白1(HMGB1)诱导血管内皮细胞肿瘤坏死因子α(TNF-α)的分泌规律及其在脓毒症中的作用. 方法:HMGB1的剂量效应组分别用含有0、0.1 mg/L、1.0 mg/L、10 mg/L、20 mg/L、50 mg/L HMGB1的培养液与人脐静脉内皮细胞株ECV-304共培养10 h,分别收取HMGB1刺激孔及对照孔细胞和培养液上清,用双抗体夹心ELISA法测其上清中的TNF-α含量, 采用流式细胞技术观察HMGB1诱导血管内皮细胞的凋亡情况.人HMGB1的时间效应组以含有20 mg/L HMG1的培养液、阳性对照组以含有100 mg/L脂多糖( LPS)的培养液、阴性对照组以不含HMGB1的培养液分别培养EVC-304细胞 0、2、4、6、8、10、12和24 h,同上留取离心后的培养液上清用双抗体夹心ELISA法测其上清中的TNF-α含量. 结果:将HMGB1加入到血管内皮细胞培养液中能明显刺激其TNF-α的分泌. 在0.1~50 mg/L范围内,HMGB1诱导EVC-304的TNF-α分泌增加,呈明显的剂量依赖性关系;HMGB1组EVC-304的TNF-α分泌在0~24 h间呈时间依赖性关系;50 mg/L HMGB1能明显诱导EVC-304细胞凋亡 . 结论:人HMGB1能诱导血管内皮细胞TNF-α的分泌与凋亡,证实HMGB1在脓毒症的发生、发展中发挥作用.
目的:探討人高遷移率族蛋白1(HMGB1)誘導血管內皮細胞腫瘤壞死因子α(TNF-α)的分泌規律及其在膿毒癥中的作用. 方法:HMGB1的劑量效應組分彆用含有0、0.1 mg/L、1.0 mg/L、10 mg/L、20 mg/L、50 mg/L HMGB1的培養液與人臍靜脈內皮細胞株ECV-304共培養10 h,分彆收取HMGB1刺激孔及對照孔細胞和培養液上清,用雙抗體夾心ELISA法測其上清中的TNF-α含量, 採用流式細胞技術觀察HMGB1誘導血管內皮細胞的凋亡情況.人HMGB1的時間效應組以含有20 mg/L HMG1的培養液、暘性對照組以含有100 mg/L脂多糖( LPS)的培養液、陰性對照組以不含HMGB1的培養液分彆培養EVC-304細胞 0、2、4、6、8、10、12和24 h,同上留取離心後的培養液上清用雙抗體夾心ELISA法測其上清中的TNF-α含量. 結果:將HMGB1加入到血管內皮細胞培養液中能明顯刺激其TNF-α的分泌. 在0.1~50 mg/L範圍內,HMGB1誘導EVC-304的TNF-α分泌增加,呈明顯的劑量依賴性關繫;HMGB1組EVC-304的TNF-α分泌在0~24 h間呈時間依賴性關繫;50 mg/L HMGB1能明顯誘導EVC-304細胞凋亡 . 結論:人HMGB1能誘導血管內皮細胞TNF-α的分泌與凋亡,證實HMGB1在膿毒癥的髮生、髮展中髮揮作用.
목적:탐토인고천이솔족단백1(HMGB1)유도혈관내피세포종류배사인자α(TNF-α)적분비규률급기재농독증중적작용. 방법:HMGB1적제량효응조분별용함유0、0.1 mg/L、1.0 mg/L、10 mg/L、20 mg/L、50 mg/L HMGB1적배양액여인제정맥내피세포주ECV-304공배양10 h,분별수취HMGB1자격공급대조공세포화배양액상청,용쌍항체협심ELISA법측기상청중적TNF-α함량, 채용류식세포기술관찰HMGB1유도혈관내피세포적조망정황.인HMGB1적시간효응조이함유20 mg/L HMG1적배양액、양성대조조이함유100 mg/L지다당( LPS)적배양액、음성대조조이불함HMGB1적배양액분별배양EVC-304세포 0、2、4、6、8、10、12화24 h,동상류취리심후적배양액상청용쌍항체협심ELISA법측기상청중적TNF-α함량. 결과:장HMGB1가입도혈관내피세포배양액중능명현자격기TNF-α적분비. 재0.1~50 mg/L범위내,HMGB1유도EVC-304적TNF-α분비증가,정명현적제량의뢰성관계;HMGB1조EVC-304적TNF-α분비재0~24 h간정시간의뢰성관계;50 mg/L HMGB1능명현유도EVC-304세포조망 . 결론:인HMGB1능유도혈관내피세포TNF-α적분비여조망,증실HMGB1재농독증적발생、발전중발휘작용.