微生物学报
微生物學報
미생물학보
ACTA MICROBIOLOGICA SINICA
2005年
2期
195-200
,共6页
杜秉海%姜巨全%李小红%王磊%杨苏声
杜秉海%薑巨全%李小紅%王磊%楊囌聲
두병해%강거전%리소홍%왕뢰%양소성
苜蓿中华根瘤菌%结瘤基因,基因敲除,结瘤作用
苜蓿中華根瘤菌%結瘤基因,基因敲除,結瘤作用
목숙중화근류균%결류기인,기인고제,결류작용
通过PCR扩增获得了042BM的noeA基因.该基因与苜蓿中华根瘤菌(Sinorhizobium meliloti)1021noeA的同源性为99%,而其NoeA与1021NoeA的相似性为97%.还发现其NoeA与中慢生根瘤菌(Mesorhizobium sp.)BNC1可能的SAM-依赖性的甲基转移酶相似性为32%,而其303～362氨基酸区域与大肠杆菌(Escherichia coli)的核糖体50S亚基的L11蛋白甲基转移酶(PrmA)的160～220氨基酸区域的相似性达到41%.通过插入卡那盒,敲除noeA,获得突变株042BMA-Km.与苜蓿中华根瘤菌042BM相比,敲除noeA的突变株在普通紫花、保定、宁夏、百发和傲汉苜蓿品种上的结瘤数、根瘤鲜重和植株地上部分的干重都有不同程度的增加,而在秘鲁苜蓿品种上的结瘤数和植株地上部分的干重明显下降,在皇后和美国杂花苜蓿品种上则没有明显的变化.
通過PCR擴增穫得瞭042BM的noeA基因.該基因與苜蓿中華根瘤菌(Sinorhizobium meliloti)1021noeA的同源性為99%,而其NoeA與1021NoeA的相似性為97%.還髮現其NoeA與中慢生根瘤菌(Mesorhizobium sp.)BNC1可能的SAM-依賴性的甲基轉移酶相似性為32%,而其303～362氨基痠區域與大腸桿菌(Escherichia coli)的覈糖體50S亞基的L11蛋白甲基轉移酶(PrmA)的160～220氨基痠區域的相似性達到41%.通過插入卡那盒,敲除noeA,穫得突變株042BMA-Km.與苜蓿中華根瘤菌042BM相比,敲除noeA的突變株在普通紫花、保定、寧夏、百髮和傲漢苜蓿品種上的結瘤數、根瘤鮮重和植株地上部分的榦重都有不同程度的增加,而在祕魯苜蓿品種上的結瘤數和植株地上部分的榦重明顯下降,在皇後和美國雜花苜蓿品種上則沒有明顯的變化.
통과PCR확증획득료042BM적noeA기인.해기인여목숙중화근류균(Sinorhizobium meliloti)1021noeA적동원성위99%,이기NoeA여1021NoeA적상사성위97%.환발현기NoeA여중만생근류균(Mesorhizobium sp.)BNC1가능적SAM-의뢰성적갑기전이매상사성위32%,이기303～362안기산구역여대장간균(Escherichia coli)적핵당체50S아기적L11단백갑기전이매(PrmA)적160～220안기산구역적상사성체도41%.통과삽입잡나합,고제noeA,획득돌변주042BMA-Km.여목숙중화근류균042BM상비,고제noeA적돌변주재보통자화、보정、저하、백발화오한목숙품충상적결류수、근류선중화식주지상부분적간중도유불동정도적증가,이재비로목숙품충상적결류수화식주지상부분적간중명현하강,재황후화미국잡화목숙품충상칙몰유명현적변화.
