精细化工
精細化工
정세화공
FINE CHEMICALS
2006年
10期
950-953
,共4页
邱广亮%赵康%李咏兰%马玉珍
邱廣亮%趙康%李詠蘭%馬玉珍
구엄량%조강%리영란%마옥진
肝癌%甲胎蛋白%免疫磁珠%酶联免疫吸附测定法
肝癌%甲胎蛋白%免疫磁珠%酶聯免疫吸附測定法
간암%갑태단백%면역자주%매련면역흡부측정법
采用戊二醛两步交联法将辣根过氧化物酶(HRP)结合于甲胎蛋白(AFP)抗体上制成酶标AFP抗体,质量鉴定结果表明其比活性为200 U/mg,抗体效价为1: 256,满足酶联免疫吸附测定法(ELISA)要求;通过滴定法确定酶标AFP抗体的最适工作稀释度为V(酶标抗体): V(磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液)=1: 160;血清用量及孵育时间的影响实验表明:血清100 μL、孵育时间2 h为最佳测定条件.建立了肝癌患者血清AFP免疫磁珠ELISA法的规范化检测程序.初步应用实验显示:免疫磁珠ELISA法测定受试健康组血清AFP值平均为3.9 ng/mL,肝癌组血清AFP值平均为316.7 ng/mL,对肝癌诊断阳性率为72.0%.批内及批间CV值分别为5.05%和8.20%.该项技术有较高的灵敏度和很好的特异性,操作简便、分离快速,适用于肝癌的初期快速诊断.
採用戊二醛兩步交聯法將辣根過氧化物酶(HRP)結閤于甲胎蛋白(AFP)抗體上製成酶標AFP抗體,質量鑒定結果錶明其比活性為200 U/mg,抗體效價為1: 256,滿足酶聯免疫吸附測定法(ELISA)要求;通過滴定法確定酶標AFP抗體的最適工作稀釋度為V(酶標抗體): V(燐痠氫二鈉-檸檬痠緩遲液)=1: 160;血清用量及孵育時間的影響實驗錶明:血清100 μL、孵育時間2 h為最佳測定條件.建立瞭肝癌患者血清AFP免疫磁珠ELISA法的規範化檢測程序.初步應用實驗顯示:免疫磁珠ELISA法測定受試健康組血清AFP值平均為3.9 ng/mL,肝癌組血清AFP值平均為316.7 ng/mL,對肝癌診斷暘性率為72.0%.批內及批間CV值分彆為5.05%和8.20%.該項技術有較高的靈敏度和很好的特異性,操作簡便、分離快速,適用于肝癌的初期快速診斷.
채용무이철량보교련법장랄근과양화물매(HRP)결합우갑태단백(AFP)항체상제성매표AFP항체,질량감정결과표명기비활성위200 U/mg,항체효개위1: 256,만족매련면역흡부측정법(ELISA)요구;통과적정법학정매표AFP항체적최괄공작희석도위V(매표항체): V(린산경이납-저몽산완충액)=1: 160;혈청용량급부육시간적영향실험표명:혈청100 μL、부육시간2 h위최가측정조건.건립료간암환자혈청AFP면역자주ELISA법적규범화검측정서.초보응용실험현시:면역자주ELISA법측정수시건강조혈청AFP치평균위3.9 ng/mL,간암조혈청AFP치평균위316.7 ng/mL,대간암진단양성솔위72.0%.비내급비간CV치분별위5.05%화8.20%.해항기술유교고적령민도화흔호적특이성,조작간편、분리쾌속,괄용우간암적초기쾌속진단.