免疫学杂志
免疫學雜誌
면역학잡지
IMMUNOLOGICAL JOURNAL
2007年
1期
80-83
,共4页
高强国%符刚%余瑾%连小华%杨恬
高彊國%符剛%餘瑾%連小華%楊恬
고강국%부강%여근%련소화%양념
uPA ATF%pGFPC1%Pam 212细胞
uPA ATF%pGFPC1%Pam 212細胞
uPA ATF%pGFPC1%Pam 212세포
目的 构建含人uPA ATF基因的真核表达质粒,并研究其对小鼠细胞株Pam 212 细胞的影响. 方法 设计引物,利用PCR从原核表达质粒中扩增人uPA ATF基因片断,并导入真核表达载体的绿色荧光蛋白pEGFPC1中,利用电泳和测序检测构建状况,荧光显微镜观察和免疫细胞化学检测转染情况,通过MTT、体外迁移实验检测对小鼠Pam 212细胞株的影响.结果 电泳和测序表明构建的质粒准确,uPA ATF cDNA阅读框完整,连接部位序列正确;质粒转染Pam 212细胞株成功,并且能抑制细胞的增殖和迁移.结论 成功构建了真核表达载体pEGFPC1-uPA ATF质粒,明确了人uPA ATF基因片断能降低小鼠细胞的增殖和迁移,为进一步在体实验研究打下了基础.
目的 構建含人uPA ATF基因的真覈錶達質粒,併研究其對小鼠細胞株Pam 212 細胞的影響. 方法 設計引物,利用PCR從原覈錶達質粒中擴增人uPA ATF基因片斷,併導入真覈錶達載體的綠色熒光蛋白pEGFPC1中,利用電泳和測序檢測構建狀況,熒光顯微鏡觀察和免疫細胞化學檢測轉染情況,通過MTT、體外遷移實驗檢測對小鼠Pam 212細胞株的影響.結果 電泳和測序錶明構建的質粒準確,uPA ATF cDNA閱讀框完整,連接部位序列正確;質粒轉染Pam 212細胞株成功,併且能抑製細胞的增殖和遷移.結論 成功構建瞭真覈錶達載體pEGFPC1-uPA ATF質粒,明確瞭人uPA ATF基因片斷能降低小鼠細胞的增殖和遷移,為進一步在體實驗研究打下瞭基礎.
목적 구건함인uPA ATF기인적진핵표체질립,병연구기대소서세포주Pam 212 세포적영향. 방법 설계인물,이용PCR종원핵표체질립중확증인uPA ATF기인편단,병도입진핵표체재체적록색형광단백pEGFPC1중,이용전영화측서검측구건상황,형광현미경관찰화면역세포화학검측전염정황,통과MTT、체외천이실험검측대소서Pam 212세포주적영향.결과 전영화측서표명구건적질립준학,uPA ATF cDNA열독광완정,련접부위서렬정학;질립전염Pam 212세포주성공,병차능억제세포적증식화천이.결론 성공구건료진핵표체재체pEGFPC1-uPA ATF질립,명학료인uPA ATF기인편단능강저소서세포적증식화천이,위진일보재체실험연구타하료기출.
